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　　病理顯像概述

　　現(xiàn)代醫(yī)學(xué)診斷方法非常多樣化，根據(jù)臨床病史.通過各種圖像進行癥狀和體征的分析診斷.CT檢查.MRI等等)診斷是常見的方法，但最終的診斷判斷通常需要病理科通過病理成像來確定。通過觀察器官的近似(人眼)變化.在鏡下觀察組織結(jié)構(gòu)和細胞病變特征的病理診斷更加客觀和準確?？陀^準確的病理診斷不僅需要醫(yī)生的專業(yè)分析，還需要通過專業(yè)的光學(xué)顯微鏡獲得準確清晰的病理圖像。

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　　臨床上不同類型的病理成像

　　根據(jù)不同的觀測對象，病理學(xué)可分為器官病理學(xué).組織病理學(xué)和分子病理學(xué)。

　　(1)器官病理學(xué):人眼或體式顯微鏡主要使用.一般相機等輔助工具，檢驗材料及其病變特性(大小.形態(tài).顏色.重量.表面和截面狀態(tài).觀察和檢測疾病特征和堅度等)，可以確定或大致確定診斷或病變特征(如腫瘤的良惡性等)。

　　(2)組織病理學(xué):將病變組織制成厚約數(shù)μm不同方法染色后用顯微鏡觀察微小病變的切片是的觀察方法.研究疾病的方法之一。以下是組織病理學(xué)中常用的幾種染色方法：

　?、貶E(蘇木精華-一紅)染色：各顯示細胞核(紫藍色)和細胞質(zhì)(粉紅色)，通常用于形態(tài)學(xué)觀察。例如，當正常組織發(fā)生癌變時，細胞質(zhì)會變小，出現(xiàn)形態(tài)變化，如多個細胞核、核仁增大和染色質(zhì)粗糙度，這是病理分析的標準之一。

　　病理組織切片

　　②PAS染色，也稱為碘酸-雪夫染色或糖原染色，通常用于顯示細胞內(nèi)或細胞外的糖原和其他多糖物質(zhì)。

　　糖原染色

　?、鄹锾m氏染色：根據(jù)細菌細胞壁的生化性質(zhì)，細菌可分為革蘭氏陽性(如葡萄球菌等)和革蘭氏陰性(如痢疾桿菌等)。染色后，陽性細菌呈紫色，陰性細菌呈紅色。選擇抗生素對區(qū)分陽性細菌和陰性細菌具有指導(dǎo)意義。

　　ML31MSX2細菌在100倍油鏡下拍攝，

　　左圖為革蘭氏陽性菌，呈紫色

　　右圖為革蘭氏陰性菌，呈紅色

　　④巴氏殺菌染色：脫落細胞染色的染色方法可以通過巴氏殺菌染色反映細胞在炎癥刺激和癌癥后的形態(tài)變化，對早期發(fā)現(xiàn)和診斷某些病變具有重要意義。宮頸癌篩查TCT巴氏染色用于宮頸液基薄層細胞檢查。

　　明美顯微鏡ML51-M組合MSX2拍攝的

　　巴氏菌染色液基細胞涂片

　　⑤油紅O脂肪染色:顯示組織中的脂肪。油紅O是一種脂溶性染料，可以高度溶解在脂肪中，可以特異性地給中性脂肪著色，如組織中的甘油三酯。

　　油紅O染色，圖自CDC

　　(3)分子病理學(xué)：根據(jù)對組織中蛋白質(zhì)或基因表達的相對定量分析，明確評估疾病過程或藥物的藥理療效。常用的分子病理學(xué)光學(xué)顯微觀測技術(shù)包括：

　?、買HC免疫組織化：特定的細胞表達特定的蛋白質(zhì)。使用能標記這種特定蛋白質(zhì)的顯色劑進行染色。在明亮的場景圖像下，根據(jù)染色狀態(tài)直接觀察組織和細胞中是否存在一些蛋白質(zhì)，從而確定細胞的類型。它通常用于確定腫瘤的分子分型，確定腫瘤的原發(fā)位置、惡性程度和愈合效果。

　　明美顯微鏡ML51-M組合MSX2.免疫組化病理圖像

　?、谠粺晒怆s交(FISH)：用英光基團標記DNA再標記探頭DNA探頭與樣本DNA進行原位雜交，最后在熒光顯微鏡下計算英光信號，作為診斷依據(jù)。這種方法可以專門識別染色體上的特定基因或特定片段。乳腺癌組織的檢測是一種常見的臨床應(yīng)用Her-二是乳癌分子靶向治療的重要靶點，F(xiàn)ISH檢驗Her-表現(xiàn)為陽性的靶向治療藥物治療效果較好。

　　明美顯微鏡MF43-N拍攝的FISH圖像

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　　應(yīng)用病理顯像光學(xué)顯微技術(shù)

　　病理成像涉及染色組織細胞.在使用光學(xué)顯微鏡進行病理顯像時，應(yīng)用光學(xué)顯微鏡進行標記處理等，一般有以下挑戰(zhàn)：

　　(1)平場和色彩還原:在鏡下觀察病理組織染色后，有時需要區(qū)分細胞核和細胞質(zhì)，并分析其數(shù)量.位置和形式要求顯微鏡具有較高的平場性和分辨率，可以識別這些細節(jié)而不失真;同時，病理成像主要依靠不同顏色的區(qū)分來判斷組織形式和病變特征。因此，無論是在鏡下還是在顯微鏡下，恢復(fù)原始顏色都是準確判斷病理的重要基礎(chǔ)。這些挑戰(zhàn)對物鏡的分辨率.偏色清除等特征.光源的色溫譜.相機的色彩還原等都提出了較高的要求。

　　明美高數(shù)值孔徑半復(fù)色差

　　高著色LED更接近陽光，同時減少視覺疲勞

　　(2)獲取英光信號：FISH在以熒光成像為代表的應(yīng)用中，英光信號呈點狀分布。在某些波段(如紫外波段)中，需要強烈的激發(fā)才能發(fā)出信號。傳統(tǒng)上，汞燈被用作激發(fā)光源，在每個波段都有很好的效果，尤其是紫外波段，但預(yù)熱時間很長.壽命短等問題。

　　明美熒光顯微鏡配套大功率四通道LED光源MG120有四個單獨的通道，可以覆蓋常見染料的激起譜段，亮度可以匹配汞燈，可以立即打開使用。超過2萬小時的使用壽命可以大大降低維護成本。

　　明美四通道LED光源MG120

　　四通道可單獨調(diào)節(jié)，亮度大，譜段寬

　　(3)人體工程學(xué)設(shè)計和可靠性設(shè)計：面對大量的檢查樣本，病理學(xué)工作者需要每天在顯微鏡下進行長時間的觀察。在滿足成像質(zhì)量的前提下，良好的人體工程學(xué)設(shè)計可以有效改善長期工作造成的疲勞。同時，由于使用頻率高.病理科的顯微鏡長期使用，給載物臺傳動等機械部件的可靠性帶來了更大的挑戰(zhàn)。

　　明美顯微鏡具有*的人體工程學(xué)設(shè)計：①明場接近陽光LED光源：暖白光LED或白光LED，接近陽光的色溫，減少長期觀察帶來的疲勞;②低手位載物臺與低手位調(diào)焦：XY軸移動手輪和粗聚焦在一個區(qū)域，便于操作。低手設(shè)計可以保證老師的手自然平放在桌面上完成操作，減少懸掛，有效減少長期工作造成的前臂和手腕疲勞。③光強管理器：型配備光強管理器，自動調(diào)整不同物鏡轉(zhuǎn)換時間的適當亮度，降低重復(fù)亮度調(diào)整，提高工作效率，確保分析條件的一致性;④金屬傳動機構(gòu)和瓷器覆蓋面負荷臺:大多數(shù)型號選擇金屬傳動XY軸向機構(gòu)，長期使用不會損壞，觸感舒適，易于維護。高檔機型采用瓷器覆蓋加載平臺，更耐磨，防止重復(fù)裝載平臺磨損，露出明亮的金屬層。

　　(4)獲取樣本組織整體圖像:鏡下視線直徑一般較小(物鏡40倍，配備22個視場數(shù)量鏡的實際視線直徑為0.55mm)，為了記錄和分析整個切片組織或連續(xù)切片組織，需要反復(fù)移動XY軸，耗時，傳統(tǒng)的顯微圖像需要在視野范圍和圖像細節(jié)之間進行選擇，不能獲得大的視野范圍和足夠豐富的圖像細節(jié)。

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　　1.HE染色.免疫組化等微觀觀察方案

　　低手位載物平臺和調(diào)焦機構(gòu).30°傾斜三目一等人體工程學(xué)設(shè)計，減少工作疲勞

　　22mm/25mm寬視線目鏡，優(yōu)秀的平場視線，提高工作效率

　　高透光率平場消色差物鏡/高值孔徑半復(fù)色差物鏡，顯示清晰的顏色

　　ML51-M采用方便的光強管理系統(tǒng)，預(yù)設(shè)不同物鏡下亮度，防止重復(fù)亮度調(diào)節(jié)