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時(shí)間：2024-8-27

　　細(xì)胞外囊泡(EVs)是從各類(lèi)細(xì)胞中分泌、釋放出來(lái)的小型膜類(lèi)結(jié)構(gòu)。這些細(xì)胞外囊泡普遍存在于各種生物體液中，包括血液、尿液和唾液。它們包含多種生物活性分子，如蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和核酸，在細(xì)胞間通訊中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。鑒于細(xì)胞外囊泡在生物體的生理過(guò)程以及疾病狀態(tài)研究中的重要性，人們對(duì)細(xì)胞外囊泡的相關(guān)分析重視度不斷提高。

　　自上世紀(jì)80年代，研究人員首次發(fā)現(xiàn)細(xì)胞外囊泡的存在以來(lái)，學(xué)界對(duì)于這些細(xì)胞外囊泡的興趣一直在增長(zhǎng)。在過(guò)去二十年里，該領(lǐng)域的研究呈現(xiàn)指數(shù)級(jí)增長(zhǎng)。

　　細(xì)胞外囊泡的分析涉及廣泛的技術(shù)領(lǐng)域，這些技術(shù)對(duì)于表征細(xì)胞外囊泡的大小、濃度、運(yùn)載量以及識(shí)別特定類(lèi)型細(xì)胞中的細(xì)胞外囊泡釋放至關(guān)重要。此外，對(duì)細(xì)胞外囊泡進(jìn)行分析可以深入了解細(xì)胞外囊泡被受體細(xì)胞吸收(胞吞)的機(jī)制以及此類(lèi)細(xì)胞介導(dǎo)的生物效應(yīng)。

　　細(xì)胞外囊泡是什么？

　　細(xì)胞外囊泡(EVs)根據(jù)其生物成因與囊泡粒徑大小的不同，大致分為以下三類(lèi)。我們可以對(duì)不同粒徑大小的小型細(xì)胞外囊泡(<200 nm)和中型/大型細(xì)胞外囊泡(> 200 nm)進(jìn)行識(shí)別研究。

　　外泌體 Exosomes

　　外泌體是一類(lèi)來(lái)自細(xì)胞內(nèi)源途徑的小型細(xì)胞外囊泡(30-150 nm)。它們是由細(xì)胞質(zhì)膜向內(nèi)萌發(fā)，進(jìn)一步轉(zhuǎn)變成多泡體(MVBs)，最后與細(xì)胞膜融合形成的。外泌體通常攜帶有多種生物分子，包括蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和核酸，并參與細(xì)胞間通訊和物質(zhì)遞送過(guò)程。

　　微囊泡 Microvesicles

　　微囊泡是一類(lèi)粒徑稍大的細(xì)胞外囊泡(100-1000 nm)，由細(xì)胞膜向外萌芽形成。微泡中攜帶有多種生物活性分子，包括生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子和信號(hào)脂質(zhì)。它們參與細(xì)胞間通訊、生物體免疫調(diào)節(jié)和凝血過(guò)程。

　　凋亡小體 Apoptotic bodies

　　凋亡小體是一類(lèi)粒徑較大的細(xì)胞外囊泡(1-5µm)，由正在經(jīng)歷程序性細(xì)胞死亡(凋亡)的細(xì)胞釋放。凋亡體中攜帶有多種生物大分子，包括細(xì)胞染色質(zhì)、酶和細(xì)胞器。凋亡體在吞噬細(xì)胞清除凋亡細(xì)胞和維持組織穩(wěn)態(tài)的過(guò)程中發(fā)揮作用。

　　細(xì)胞外囊泡的作用？

　　細(xì)胞外囊泡參與生物體中各類(lèi)生理與病理過(guò)程，研究人員對(duì)細(xì)胞外囊泡在醫(yī)學(xué)和生物技術(shù)中的潛在應(yīng)用開(kāi)展了大量研究。由于細(xì)胞外囊泡具有廣泛的生物用途，目前許多臨床前和臨床中的研究都在探索其治療潛力。

　　細(xì)胞間通訊 Intercellular communication

　　細(xì)胞外囊泡可以在細(xì)胞間傳遞蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、核酸等生物大分子，因此其在細(xì)胞間通訊過(guò)程中發(fā)揮重要的作用。細(xì)胞外囊泡介入細(xì)胞間的通訊過(guò)程可以影響各種生理和病理過(guò)程，包括免疫反應(yīng)、組織再生和癌癥發(fā)展過(guò)程。

　　診斷標(biāo)志物 Diagnostic markers

　　細(xì)胞外囊泡可以作為各種疾病的診斷標(biāo)志物，因?yàn)槠渲邪从撤置诩?xì)胞生理狀態(tài)的生物分子。例如，循環(huán)細(xì)胞外囊泡已被證明含有癌癥和神經(jīng)退行性疾病的生物標(biāo)志物，針對(duì)這類(lèi)細(xì)胞外囊泡的分析、研究可以幫助疾病診斷和預(yù)后。

　　藥物遞送 Apoptotic bodies

　　細(xì)胞外囊泡可以通過(guò)工程化改造用于向靶細(xì)胞遞送藥物或核酸等治療性分子。與傳統(tǒng)藥物遞送系統(tǒng)相比，胞外囊泡遞送系統(tǒng)具有生物相容性高、免疫原性低和能夠跨越生物屏障等優(yōu)勢(shì)。

　　組織工程學(xué) Tissue engineering

　　細(xì)胞外囊泡可以通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞行為和細(xì)胞信號(hào)通路，促進(jìn)組織的再生和修復(fù)。目前，細(xì)胞外囊泡已被應(yīng)用于各類(lèi)組織工程學(xué)的研究中，包括骨再生、軟骨修復(fù)和傷口愈合。

　　HORIBA 解決方案

　　HORIBA Scientific 儀器提供的細(xì)胞外囊泡表征方案如下：

　　粒徑和濃度測(cè)量

　　ViewSizer 3000

　　HORIBA 納米顆粒追蹤分析儀(NTA)可以精確測(cè)量細(xì)胞外囊泡 EVs 的大小和濃度。NTA 是 EVs 表征的強(qiáng)有力工具，它可以同時(shí)測(cè)量顆粒的大小和濃度。此外，使用 NTA 熒光模塊可以根據(jù)其生物分子含量區(qū)分不同的 EVs 亞群。

　　• 多分散樣品的精確尺寸分布

　　• 無(wú)需校準(zhǔn)標(biāo)樣

　　• 顆粒濃度測(cè)量

　　• 寬動(dòng)態(tài)范圍 (10 nm - 15 μm)

　　• 無(wú)交叉污染

　　• 納米顆?？梢暬瑢?shí)時(shí)跟蹤運(yùn)動(dòng)軌跡

　　• 具有統(tǒng)計(jì)意義的逐個(gè)粒子檢測(cè)方法

　　Zeta電位和粒徑測(cè)量

　　nanoPartica SZ-100V2

　　細(xì)胞外囊泡(EVs)的 Zeta 電位可以為其表面電荷和穩(wěn)定性提供有價(jià)值的信息。HORIBA的 Zeta 電位分析儀可以測(cè)量 EVs 的 Zeta 電位，研究人員能夠據(jù)此了解 EVs 如何與其他生物結(jié)構(gòu)相互作用。納米粒度及 Zeta 電位分析儀 SZ-100V2 還可以提供 EVs 大小的信息。

　　• 多分散樣品的精確尺寸分布

　　• 粒徑分布

　　• 平均尺寸的測(cè)定

　　• Zeta 電位的測(cè)定

　　• 懸浮液中 EVs 的膠體穩(wěn)定性

　　化學(xué)結(jié)構(gòu)鑒定

　　LabRAM Soleil

　　拉曼光譜技術(shù)是一種*的分析技術(shù)，可用于識(shí)別細(xì)胞外囊泡的化學(xué)成分。利用極少量的樣品就可以獲得蘊(yùn)含大量信息的高分辨率光譜，是理想的細(xì)胞外囊泡表征方法。拉曼光譜與原子力顯微鏡技術(shù)(AFM)相結(jié)合，可以對(duì)納米級(jí)的細(xì)胞外囊泡進(jìn)行更高效地分析，獲得納米尺度的信息，如細(xì)胞外囊泡結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成以及形貌分布信息。這使得 AFM-Raman 平臺(tái)成為外囊泡領(lǐng)域強(qiáng)有力的研究工具。

　　• 化學(xué)組成成像

　　• 機(jī)械性能

　　• 囊泡可視化

　　• 質(zhì)量控制

　　• 純度分析

　　A-TEEM指紋熒光技術(shù)

　　Aqualog

　　A-TEEM 熒光方法可快速鑒定分子指紋、區(qū)分外泌體類(lèi)型、檢測(cè)污染物并研究細(xì)胞外泌體的生物分布。它是一種非破壞性、無(wú)標(biāo)記的分析工具，對(duì)許多常見(jiàn)的輔料不敏感，但對(duì)蛋白質(zhì)高度敏感，因此對(duì)細(xì)胞外泌體也十分敏感。A-TEEM 圖譜能更好地揭示復(fù)雜基質(zhì)中的蛋白質(zhì)特征。這使得 A-TEEM 成為 QA/QC 和流程分析的重要工具。

　　• 獨(dú)特的分子指紋表征

　　• 表型分析

　　• 樣本間差異分析

　　• 聚集評(píng)估

　　• 污染物檢測(cè)

　　• 分子結(jié)合

　　• 溶劑效應(yīng)可視化

　　生物標(biāo)志物與親和力

　　Open Plex

　　表面等離子體共振成像的主要優(yōu)勢(shì)在于它能夠提供有關(guān)特定表面標(biāo)記物存在的信息。這些信息可用于區(qū)分具有不同生物功能的不同外泌體亞群。

　　• 生物分子相互作用

　　• 動(dòng)力學(xué)特征

　　• 親和力測(cè)定

　　• 無(wú)標(biāo)記

　　• 粗提樣品分析

　　// HORIBA 外泌體解決方案

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