純化小技巧 | “藍(lán)膠”用得好，純化沒煩惱

發(fā)布時(shí)間：2023-10-12

　　Blue 系列的層析介質(zhì)通常也被大家親切稱為“藍(lán)膠”，它是將Cibacron Blue共價(jià)連接到高度交聯(lián)瓊脂糖基架上而制成的親和層析介質(zhì)。

　　藍(lán)色染料Cibacron Blue可與多種蛋白質(zhì)結(jié)合，如白蛋白、脂蛋白、干擾素、凝血因子；也可與多種酶結(jié)合，如激酶、脫氫酶和大多數(shù)需要含腺苷輔因子的酶(如NAD+)。

　　Blue Chromstar FF，MaXtar Blue和MaXtar Blue (HS)主要應(yīng)用于白蛋白和干擾素的大規(guī)模純化，酶的分離純化，白蛋白的去除等方面。

　　參數(shù)介紹　

*結(jié)合載量的測(cè)量條件：層析柱：4.7ml預(yù)裝柱；平衡緩沖液：20 mM 檸檬酸, pH 5.5；洗脫緩沖液：50mM磷酸鈉，2M氯化鈉，pH 7；將過量的人血清白蛋白上樣至層析柱，測(cè)量人血清白蛋白10%穿透時(shí)的動(dòng)態(tài)結(jié)合載量(QB10)。

**層析介質(zhì)在40℃，pH3-13 環(huán)境下放置7 天后，其理化性質(zhì)和功能沒有明顯變化。

***v/v，體積比。

　性能表現(xiàn)--載量和回收率　

　　采用人血清白蛋白作為樣品，對(duì)Blue Chromstar FF，MaXtar Blue和MaXtar Blue (HS)的DBC(動(dòng)態(tài)結(jié)合載量)進(jìn)行比較。