熒光染料簡易指南

時間：2022/3/28

熒光染料簡易指南

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熒光染料（或稱熒光素）常用作細(xì)胞成像和流式細(xì)胞術(shù)等多種應(yīng)用的檢測試劑。熒光染料可吸收特定波長的光能，然后以更長的波長重新發(fā)射光能。熒光染料吸收和發(fā)射光的波長分別構(gòu)成熒光染料的激發(fā)和發(fā)射光譜（或簡稱為熒光染料光譜）。

流式細(xì)胞儀或其它需要使用熒光染料的儀器配備有激光器，激光器能產(chǎn)生特定波長的光，從而激發(fā)能吸收該特定波長的光的熒光染料。然后該熒光染料發(fā)射的光通過濾光鏡，因此每個傳感器只能檢測到一定范圍內(nèi)的被濾光鏡濾過的熒光。所檢測的熒光即為儀器所識別的信號。

目前已研發(fā)了許多不同的熒光染料，每種都具有特定的發(fā)射和激發(fā)光譜?，F(xiàn)在，在整個可見光譜范圍（包括紅外區(qū)域）內(nèi)可以吸收并發(fā)射特定波長的光的熒光染料都已經(jīng)商品化。此外，熒光染料發(fā)射光的強(qiáng)度也有區(qū)別。熒光染料的亮度取決于其吸收光的能力和吸收光轉(zhuǎn)化為發(fā)射光的效率。

如果不借助合適的工具，選擇適用于后續(xù)實驗的熒光染料可能比較困難。如果所設(shè)計的實驗為需要兩種或更多種熒光染料的多色實驗時，選擇熒光染料將變得更加困難。在多色實驗中，必須注意熒光染料之間的光譜重疊以及其它因素，才能盡量減少可能出現(xiàn)的問題，例如熒光溢出。

R-PE-Cy7
Cy7
APC-Cy7
AF700
APC-Cy5.5
PerCP-Cy5.5
DRAQ5
PerCP
AF647
R-PE-Cy5.5
R-PE-Cy5
Cy5
APC
7-AAD
TR
AF594
R-PE-TR
PI
AF568
R-PE
AF555
Cy3
FITC
AF488
GFP
PB
BV421
AF405
DAPI

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