產(chǎn)品名稱：

人總Tau蛋白檢測試劑盒（ELISA）Human Total Tau Assay Kit - IBL

產(chǎn)品規(guī)格

96T

產(chǎn)品預(yù)期用途

本產(chǎn)品僅供科研用，不用于臨床診斷。

檢測原理

該人總Tau蛋白檢測試劑盒是固相夾心ELISA（酶聯(lián)免疫吸附測定）。當(dāng)將第一抗體包被在平板上時(shí)，將樣品和標(biāo)準(zhǔn)品加入到板孔中進(jìn)行第一次反應(yīng)。 反應(yīng)后，加入HRP-綴合的二抗進(jìn)入板孔進(jìn)行第二次反應(yīng)。 沖洗掉未結(jié)合的二抗后，將四甲基聯(lián)苯胺（TMB）加入孔中并顯色。

檢測樣本

人腦脊液

儲存條件

2-8℃保存，有效期見試劑盒外包裝

試劑盒成分

1  預(yù)包被板

2  酶標(biāo)記抗體:

3  標(biāo)準(zhǔn)品:

4  EIA緩沖液:  

5  標(biāo)記抗體稀釋液:                    

6  顯色劑:  

7  終止液:  

8  濃縮洗滌液:        

實(shí)驗(yàn)所需器材(但試劑盒沒有提供)

 酶標(biāo)儀                        微移液管及其槍頭

 量筒及燒杯               去離子水

 冰箱(4°C)                   坐標(biāo)紙(log/log)

 吸水紙                        試管(用于標(biāo)準(zhǔn)品稀釋)

 洗瓶 (用于洗板)  孵育器（37±1℃）

 一次性試劑管(用于濃縮酶標(biāo)記抗體和顯色劑)

實(shí)驗(yàn)操作步驟

準(zhǔn)備

1) 洗滌液的準(zhǔn)備

試劑盒的洗滌液是一種40倍濃縮液,應(yīng)稀釋為1X洗滌液進(jìn)行洗板用。使用前平衡至室溫并混勻，根據(jù)需要量進(jìn)行配置。

2）酶標(biāo)記抗體的準(zhǔn)備

試劑盒中的標(biāo)記抗體是一種30倍濃縮物,根據(jù)所需量用標(biāo)記抗體稀釋液稀釋.稀釋后的標(biāo)記抗體才能用于檢測步驟。

示例:

如果你用一條板(8孔),就需800μL.的標(biāo)記抗體。用870 μL的標(biāo)記抗體稀釋液稀釋30  μL濃縮液,充分混勻.并每孔各加100 μL此步操作需要酶標(biāo)記物加入之前才能進(jìn)行

剩余的濃縮標(biāo)記抗體液需密封瓶裝,存于4°C

2) 標(biāo)準(zhǔn)品的準(zhǔn)備

加0.5 mL的去離子水到瓶裝標(biāo)準(zhǔn)品中充分溶解,制成2,200 pg/mL. 的標(biāo)準(zhǔn)品液，該溶解后的標(biāo)準(zhǔn)品可以冷凍保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋

準(zhǔn)備7支試管,并每支各加230 μL  EIA緩沖液.

將2,200 pg/mL. 的標(biāo)準(zhǔn)品230ul加入到試管-1中混勻，制成1100 pg/mL. 的標(biāo)準(zhǔn)品，再取1100 pg/mL. 的標(biāo)準(zhǔn)品230ul到試管-2中混勻，550 pg/mL. 的標(biāo)準(zhǔn)品，以此類推，做2倍倍比稀釋，制成1100—17.2 pg/mL. 的標(biāo)準(zhǔn)品系列。