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本應(yīng)用介紹了通過(guò)SEC-HPLC對(duì)大腸埃希菌表達(dá)HPV18 VLPs進(jìn)行高效分離檢測(cè)的方法。用了TSKgel G5000PW凝膠色譜柱進(jìn)行了分析，3批HPV18 VLPs均可見(jiàn)單一組分峰，峰型較對(duì)稱。
方案詳情：
人乳頭瘤病毒（human papillomavirus，HPV）是人體的一種病毒，易感染人類表皮和粘膜鱗狀上皮，引起宮頸癌、肛-門癌和生殖器病變等疾病。流行病學(xué)調(diào)查顯示，約 70%的宮頸癌由 HPV16和18兩種型別感染導(dǎo)致。HPV主要衣殼蛋白 L1 組成的病毒樣顆粒（virus-like particles，VLPs）具有與天然病毒類似的結(jié)構(gòu)，保留了天然病毒的中和表位，又不攜帶病毒基因組，具有較高的安全性，是良好的疫苗抗原。
本應(yīng)用介紹了通過(guò)SEC-HPLC對(duì)大腸埃希菌表達(dá)HPV18 VLPs進(jìn)行高效分離檢測(cè)的方法。采用了TSKgel G5000PW凝膠色譜柱進(jìn)行了分析，3批HPV18 VLPs均可見(jiàn)單一組分峰，峰型較對(duì)稱。
采用TSKgel G5000PW 分離人乳頭瘤病毒 18 型病毒樣顆粒
人乳頭瘤病毒（HPV18）病毒樣顆粒（VLPs）
（Human papilloma virus type18 VLPs）
人乳頭瘤病毒(human papillomavirus，HPV)是人體的一種病毒，易感染人類表皮和粘膜鱗狀上皮，引起宮頸癌、肛-門癌和生殖器病變等疾病。流行病學(xué)調(diào)查顯示，約 70%的宮頸癌由 HPV16 和 18兩種型別感染導(dǎo)致。HPV 主要衣殼蛋白 L1 組成的病毒樣顆粒（virus-like particles，VLPs）具有與天然病毒類似的結(jié)構(gòu)，保留了天然病毒的中和表位，又不攜帶病毒基因組，具有較高的安全性，是良好的疫苗抗原。這里采用 TSKgel G5000PW 色譜柱對(duì)大腸埃希菌表達(dá)HPV18 VLPs，進(jìn)行了高效尺寸排阻色譜（HPSEC）的分離檢測(cè)。 |
【樣品制備】
大腸埃希菌表達(dá)HPV18 VLPs 參考方法[1]制備。
【分析條件】
色譜柱：TSKgel G5000PW（I.D. 7.8 mm×30 cm，17 μm）流動(dòng)相： PBS（pH 6.0）
柱溫：室溫
檢測(cè)器參數(shù)：UV @280nm
樣品：
圖 1 HPV18 VLPs 的高效液相色譜純度分析
【結(jié)果與討論】
采用TSKgel G5000PW 凝膠色譜柱可對(duì)HPV18 VLPs 進(jìn)行高效分離檢測(cè)，3 批 HPV18 VLPs 均可見(jiàn)單一組分峰，峰型較對(duì)稱。
參考資料：
1. 曹歡歡 人乳頭瘤病毒 18 型病毒樣顆粒的特征分析. 中國(guó)生物制品學(xué)雜志，2020, 33(8): 929?933
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日本東曹株式會(huì)社（TOSOHCORPORATION）始建于1935年，原名東洋曹達(dá)工業(yè)株式會(huì)社，現(xiàn)已發(fā)展成為涉足石油化工、基礎(chǔ)化學(xué)、精細(xì)化工、電子材料、生命科學(xué)等多項(xiàng)事業(yè)的性跨國(guó)企業(yè)，2009年度銷售額已超過(guò)80億美金。TSKgel系列產(chǎn)品于1972年問(wèn)世，**將H型聚合物色譜柱用于有機(jī)可溶性聚合物的分析。1977年，Tosoh推出SW型凝膠過(guò)濾柱，成為高性能凝膠過(guò)濾柱產(chǎn)品的創(chuàng)造，更在生物科技等新興領(lǐng)域中成為蛋白質(zhì)分子量分析的代名詞。1978年開(kāi)始使用PW型系列柱實(shí)施水溶性聚合物的凝膠過(guò)濾分析。數(shù)年來(lái)，填料合成技術(shù)與柱工藝學(xué)的發(fā)展不斷推動(dòng)著H、SW、PW型柱的改良...
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