60205-50 柱式質(zhì)粒DNAout 50 次1160  價(jià)格            
【一般貯存】必須防潮、避光、陰涼處保存
【組織培養(yǎng)基貯存】較長(zhǎng)時(shí)間的貯存，必須放在2~6℃的冰箱內(nèi)
【注意事項(xiàng)】：由于液體培養(yǎng)基不易*保管，現(xiàn)在均改制成粉末。
【貯存方法】：培養(yǎng)基由于配制的原料不同，使用要求不同，而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后，易被細(xì)菌污染或分解變質(zhì)，因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。對(duì)一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基（如組織培養(yǎng)基），較長(zhǎng)時(shí)間的貯存，必須放在2~6℃的冰箱內(nèi)。由于液體培養(yǎng)基不易*保管，現(xiàn)在均改制成粉末。
【常見(jiàn)培養(yǎng)基有】：細(xì)菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、微藻培養(yǎng)基、真菌培養(yǎng)基、食用菌菌種培養(yǎng)基、煙草的培養(yǎng)基、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基
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培養(yǎng)基是根據(jù)微生物生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)需要，用人工方法配置而成的培養(yǎng)基質(zhì)，其中還有水、碳源、無(wú)機(jī)鹽及各種生長(zhǎng)因子，培養(yǎng)基可為微生物的生長(zhǎng)提供能源、組成菌體的原料，調(diào)節(jié)代謝活動(dòng)。
不同微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的要求各不相同，因此，配置培養(yǎng)基要根據(jù)微生物的營(yíng)養(yǎng)特點(diǎn)。一般培養(yǎng)細(xì)菌常用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，培養(yǎng)放線菌常用淀粉培養(yǎng)基，培養(yǎng)霉菌常用馬鈴薯培養(yǎng)基。
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 1）母液配制必須嚴(yán)格分類
配制高濃度的母液是植物組織培養(yǎng)的基本功。配制母液的目的，除了多次取用、節(jié)省實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備的時(shí)間外，還有抑制雜菌生長(zhǎng)的作用。高濃度的母液能夠有效地抑制細(xì)菌與霉菌的生長(zhǎng)，加上低溫環(huán)境 （ 4℃） ，能夠大大增加培養(yǎng)基的存放時(shí)間（ 一年左右 ） 。一般而言，培養(yǎng)基中的各個(gè)成分可以按照表1的分類方式配成母液。
伊紅美藍(lán)瓊脂（EMB）4℃避光保存，用時(shí)按照母液倍數(shù)進(jìn)行稀釋即可。
母液分類的依據(jù)，是要避免MS培養(yǎng)基中某些成分發(fā)生沉淀反應(yīng)。例如，如果將全部的大量元素混合在一起配制，則KH2PO4和CaCl2 易產(chǎn)生Ca3（ PO4）2沉淀，而CaC12和MgSO4 將生成CaSO4 沉淀。
除上述成分外，還必須加上蔗糖、瓊脂以及激素，才構(gòu)成用于組織培養(yǎng)的MS培養(yǎng)基。
2）激素的溶解方法
MS培養(yǎng)基中常用的激素，如2,4 - D、NAA、6-BA，也要配制成 10～20倍母液，這樣便于稱量（激素的用量極小，給稱量造成不便），且可以多次取用。激素的配制與一般的藥品不同，需要助溶劑。
如要配制 10 mL的 1mg／mL 2，4- D母液，則應(yīng)稱取0.01g 2，4 - D固體，置于小燒杯中， 再以 1～3 mL的95％乙醇（或 0.1 mo l／L NaOH） 溶解，zui后緩慢加入蒸餾水定容。即每加入1 mL蒸餾水，立即攪拌均勻，使白色沉淀消失。重復(fù)數(shù)次，直至定容 。
一般而言，生長(zhǎng)素類物質(zhì)2,4-D、 N AA） 要用95％乙醇（或0.1 mo l／L NaOH）助溶，而細(xì)胞分裂素類物質(zhì)（如6-BA）要用0.1 mo l／L的HC1助溶。助溶劑的用量一定要小，不能因其溶解效果好而過(guò)量使用，否則將影響培養(yǎng)基的質(zhì)量（改變培養(yǎng)基成分或 pH值） 。配制好的激素要常溫避光保存，盡快使用（盡量不超過(guò)一個(gè)月）。將激素母液保存在 4 ℃冰箱中， 希望獲得較長(zhǎng)的保存時(shí)間。但事實(shí)上這種做法是不可取的，因?yàn)榧に卦诘蜏丨h(huán)境中易析出沉淀，影響使用效果
3）危險(xiǎn)藥品的使用與保管
盡管組織培養(yǎng)技術(shù)已經(jīng)相當(dāng)成熟，也很普及，但該技術(shù)并不安全。除注意滅菌鍋、超凈臺(tái)等大型儀器的使用安全外 ，zui重要的當(dāng)屬危險(xiǎn)藥品的使用與保管。原則上，MS培養(yǎng)基中任何一種藥品都有一定的危險(xiǎn)性。現(xiàn)只把zui突出、zui需要預(yù)防的藥品注釋如下。
（ 1 ） NH4NO3、 KNO3
此兩種藥品為易爆品，取用時(shí)一定要輕拿輕放，保存在陰涼處。另外，目前NH4NO3，的購(gòu)買受到一定的限制，也可以考慮使用其他培養(yǎng)基，如N6或B5培養(yǎng)基，無(wú) NH4 NO3成分，亦為組織培養(yǎng)所常用。
（2） EDTA- Na2 、CoC12、 2，4-D 此三種藥品為致癌物，配制時(shí)要帶膠皮手套，或兩層塑料手套。EDTA-Na為金屬螯合劑，有一定的粘性；CoCl2能夠?qū)е禄蛲蛔?，遺傳學(xué)實(shí) 驗(yàn)中也常用其作為致突變劑；2，4 - D是高效農(nóng)藥，對(duì)人的皮膚有傷害作用。
4）熱水定容原則
在母液、激素、蔗糖、瓊脂都加入后，很多人習(xí)慣用微波爐或電磁爐加熱溶解培養(yǎng)基（特別是瓊脂） 。培養(yǎng)基熔化后，由于水分的蒸發(fā)，會(huì)造成體積的減少，從而需要定容。這時(shí)一定要用熱水（ 60℃左右） 進(jìn)行定容，切忌用冷水（ 30℃以下），否則培養(yǎng)基中局部的瓊脂將凝 固，造成營(yíng)養(yǎng)成分濃度不均。
5）關(guān)于調(diào)節(jié) p H
適合的p H保證了營(yíng)養(yǎng)成分的正常發(fā)揮，也決定了培養(yǎng)基的硬度（偏酸則過(guò)軟，偏堿則過(guò)硬，都不利于組織的生長(zhǎng)） ，故要十分留意。對(duì)于MS 培養(yǎng)基而言，只要各個(gè)成分按照用量精確加入，并且在熔化培養(yǎng)基時(shí)加熱時(shí)間適合（ 平均100 mL培養(yǎng)基加熱60～90s ， 保證*熔化的同時(shí)，盡量限制加熱時(shí)間） ，則培養(yǎng)基的pH自然地將處于zui適范圍內(nèi)。調(diào)解 pH時(shí)用電子pH計(jì)，以保證精確度。pH試紙的誤差較大，要小心調(diào)節(jié)?？梢詫H調(diào)到比zui適值小一些，因?yàn)榕囵B(yǎng)基在滅菌后，p H將變大。