傳染性胸膜肺炎抗體檢測試劑盒

豬胸膜肺炎抗體ELISA檢測試劑盒說明

臨床意義

       豬接觸傳染性胸膜肺炎是由豬胸膜肺炎放線桿菌（Porcine actinobacillus pleuropneumoniae,APP）引起的一種以肺炎和胸膜肺炎為特征的呼吸道傳染病。原稱副豬嗜血桿菌病、豬嗜血桿菌胸膜肺炎。本病的廣泛傳播與養(yǎng)豬生產(chǎn)的集約化有著密切的關(guān)系，已成為集約化養(yǎng)豬臨床和病理上一個獨(dú)立的疾病。檢測特異性豬胸膜肺炎抗體，可作為豬場胸膜肺炎疫苗的免疫監(jiān)測及該病的輔助診斷。

       本試劑盒采用豬胸膜肺炎蛋白作為固相抗原，用于檢測豬血清中抗抗豬胸膜肺炎IgG抗體。本試劑靈敏度高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好，操作方便快速，可分多次使用。

試劑組成

1.預(yù)包被板1套;                                       6. 樣本稀釋液（5號液）1支;

2.酶結(jié)合物（1號液）1支;                             7. 終止液（6號液）1支;

3.洗滌液（2號液）1支;                                8. 陽性對照品1支;

4.底物（3號液）1支;                                   9. 陰性對照品1支;

5.顯色劑（4號液）1支;                               10.使用說明書1份;

操作程序

·         樣本稀釋：用樣本稀釋液（5號液）將待檢血清按1:101稀釋，如取5ul血清與500ul樣本稀釋液充分混勻；陰、陽對照不用稀釋,直接加樣。

·         加樣反應(yīng)：取出所需反應(yīng)板條，樣本檢測孔每孔分別加已稀釋樣本血清100ul。同時設(shè)陰性、陽性及空白對照各1孔，取陰性、陽性對照各100ul分別加入反應(yīng)孔內(nèi)，空白對照孔僅加入100ul樣本稀釋液（5號液）。37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體，每孔加洗滌液（2號液）1滴，立即用蒸餾水注滿，靜置30秒后甩去，再直接用蒸餾水洗滌四次，每次均靜置30秒后甩去，zui后一次甩去拍干。

·         加酶反應(yīng)：除空白對照孔外其余每孔加酶結(jié)合物（1號液）2滴，37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體，如上洗滌，拍干。

·         顯色反應(yīng)：加底物（3號液）和顯色劑（4號液）各1滴，混勻，37℃下避光顯色10分鐘。加終止液（6號液）1滴，混勻，終止反應(yīng)（加終止液后藍(lán)色會變?yōu)辄S色）。

結(jié)果判斷

1         肉眼觀察：陰性對照接近無色，陽性對照呈明顯黃色，表示試驗(yàn)有效。待檢孔接近無色表示該標(biāo)本為陰性，待檢孔呈明顯黃色表示該標(biāo)本為陽性。

2         儀器判斷：以空白對照調(diào)零用酶標(biāo)儀于450nm（620nm作參比波長）讀取O.D值，待檢孔O.D值大于陰性對2.1倍者為陽性。當(dāng)陰性對照O.D值低于0.07時按0.07計(jì)算。

注意事項(xiàng)

1.試劑盒在2-8℃下保存，每次取出時先平衡至室溫后使用。滴瓶每次用后一定要將蓋擰緊，各瓶蓋之間切不可混用。各試劑盒之間不可混用。

2.洗滌時將蒸餾水加滿各孔，每次停放三十秒鐘后甩去孔內(nèi)液體。禁用自來水等其它水源。

3.為提高試驗(yàn)的可比性建議使用儀器判讀結(jié)果，并對陰性對照測復(fù)孔以減少誤差。

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