BIU-87人膀胱癌細(xì)胞
名稱 | BIU-87 (人膀胱癌細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
別稱 | BIU87 |
種屬 | 人 |
生長特性 | 貼壁細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
生長培養(yǎng)基 | RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S |
凍存條件 | 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度：液氮 |
培養(yǎng)條件 | 氣相：空氣，95%；CO2，5%溫度：37℃ |
推薦傳代比例 | 1:2-1:3 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
背景描述 | BIU-87細(xì)胞是由俞莉章等建系于1989年；BIU-87細(xì)胞來源于人膀胱乳頭狀移行上皮癌，通常采用5×10^8細(xì)胞、0.2ml的接種體積接種至裸鼠皮下；BIU-87細(xì)胞呈進(jìn)行性腫瘤生長，腫瘤結(jié)節(jié)病檢與原標(biāo)本癌組織相似。BIU-87細(xì)胞22代群體倍增時間為34小時；BIU-87細(xì)胞能在軟瓊脂上生長，克隆形成率23%。BIU-87細(xì)胞對ConA、WGA、PSL均有凝集反應(yīng)。 |
細(xì)胞類型 | 腫瘤細(xì)胞 |
腫瘤類型 | 膀胱癌細(xì)胞 |
生物安全等級 | 1 |
保藏機(jī)構(gòu) | KCB; KCB 2006103YJ |
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min（視細(xì)胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
三、培養(yǎng)注意事項
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1：2 傳代。
9. 注意： 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。
公司正在出售的產(chǎn)品：
GAD-Ab ELISA Kit | 大豆擬莖點(diǎn)種腐病菌PCR試劑盒 |
α-SMA ELISA Kit | 豬腸道甲型RT-PCR試劑盒 |
2，3-Disphosphoglycerate，2，3-DPG ELISA Kit | 變形絲囊霉菌PCR檢測試劑盒 |
TLR-9/CD289 ELISA Kit | 邊緣無漿體PCR檢測試劑盒 |
AT ELISA Kit | 奧葉茲基氏病病毒PCR試劑盒 |
3-hydroxy-3-methylglutaryl-Coenzyme A synthase 1,HMGCS1 ELISA Kit | 豬腺病毒PCR試劑盒 |
gp210 ELISA Kit | 豬源性成分(Porcine)核suan檢測試劑盒 |
β2-GP ELISA Kit | 埃立克體屬通用PCR檢測試劑盒 |
5-hydroxyindolacetic acid，5-HIAA ELISA Kit | 埃立克體PCR檢測試劑盒 |
β Lactoglobulin，β-Lg ELISA Kit | 豬圓環(huán)病毒通用型(PCV-U)核suan檢測試劑盒 |
Pentosidine ELISA Kit | aGT 小鼠血管緊張su原ELISA檢測試劑盒 |
α1-AGP ELISA Kit | 160kDa核孔蛋白(NUP160)ELISA試劑盒 |
α-SMA ELISA Kit | BIU-87人膀胱癌細(xì)胞組蛋白脫乙?；?/span>5(HDAC5)ELISA試劑盒 |
3-hydroxy-3-methylglutaryl-Coenzyme A synthase 1,HMGCS1 ELISA Kit | 17-OHP 大鼠17羥孕酮ELISA檢測試劑盒 |
1-Desamino 8D Arginine Vasopressin(DDAVP)ELISA Kit | 2,3-二磷suan甘油suan(2,3-BPG)ELISA試劑盒 |
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