本網(wǎng)站銷售的所有產(chǎn)品均不得用于人類或動(dòng)物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。

測定原理：

在弱酸性條件下，F(xiàn)FA與銅鹽反應(yīng)生成銅皂，在715nm處有特征吸收峰，在一定范圍內(nèi)游離脂肪酸含量與顯色程度呈線性關(guān)系。

自備儀器和用品：

研缽、臺(tái)式離心機(jī)、震蕩儀、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板。

試劑組成和配制：

試劑一：液體100mL×1瓶，4℃保存。

試劑二：液體20mL×1瓶，4℃保存。

試劑三：液體20mL×1瓶，4℃保存。

樣品中FFA提取：

組織用蒸餾水沖洗干凈后，用吸水紙吸取表面水分，搗碎后按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）加入試劑一，震蕩提取3h，8000g，4℃離心10min，取上清液待測。

測定操作：

1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長到715 nm。

2. 對照管：取上清液0.4mL，加0.2mL試劑二，充分震蕩5min，室溫靜置5min，取上層200μL于微量石英比色皿/96孔板，調(diào)零。

3. 測定管：取上清液0.4mL，加0.2mL試劑三，充分震蕩5min，室溫靜置5min，取上層200μL于微量石英比色皿/96孔板，測定吸光值，記為A。

FFA含量計(jì)算：

a. 使用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=0.0075 x+ 0.0055，R2=0.994

（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算

FFA（nmol/mg prot）= (A-0.0055)÷0.0075×V1÷(V1×Cpr)=133×(A-0.0055)÷Cpr

（2）按樣本質(zhì)量計(jì)算

FFA（nmol/g 鮮重）= (A-0.0055)÷0.0075×V1÷(V1÷V2×W)=133×(A-0.0055)÷W

V1：加入樣本體積，0.4mL；V2：提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣品質(zhì)量，g。

b.使用96孔板測定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=0.0038 x+ 0.0055，R2=0.994

（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算

FFA（nmol/mg prot）= (A-0.0055)÷0.0038×V1÷(V1×Cpr)=266×(A-0.0055)÷Cpr

（2）按樣本質(zhì)量計(jì)算

FFA（nmol/g 鮮重）= (A-0.0055)÷0.0038×V1÷(V1÷V2×W)=266×(A-0.0055)÷W

V1：加入樣本體積，0.4mL；V2：提取液體積，1mL； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣品質(zhì)量，g。

注意事項(xiàng)：

1. 蛋白含量不可直接用提取的上清液直接測定，可用蒸餾水或緩沖液或生理鹽水選用本公司的BCA法蛋白含量測定試劑盒。

2. 檢出限為2 nmol/mL。

公司正在出售的產(chǎn)品：