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產品簡介
土壤亞硝酸還原酶(SNiR)測試盒產品參數
| 產地 | 國產 | 規(guī)格 | 100管/48樣、50管/24樣 |
| 級別 | 其他 |
土壤亞硝酸還原酶(SNiR)測試盒可將NO2—還原為NO，使樣品中參與重氮化反應生成紫紅色化合物的NO2—減少，即540nm處吸光值的變化可反應土壤中亞硝酸還原酶的活性。
土壤亞硝酸還原酶(SNiR)測試盒詳細信息
本網站銷售的所有產品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
貨號 | 產品名稱 | 規(guī)格 |
AS6321299 | 土壤亞硝酸還原酶(SNiR)測試盒 | 100管/48樣 |
AS6321299 | 土壤亞硝酸還原酶(SNiR)測試盒 | 50管/24樣 |
測定意義
土壤亞硝酸還原酶是反硝化作用中的關鍵酶之一，參與亞硝酸鹽至NO的還原反應，它的活性反映了生物降解過程中氮素的轉化效率，為氮素轉化規(guī)律的研究提供一定的依據。
測定原理
亞硝酸還原酶可將NO2—還原為NO，使樣品中參與重氮化反應生成紫紅色化合物的NO2—減少，即540nm處吸光值的變化可反應土壤中亞硝酸還原酶的活性。
需自備的儀器和用品
天平、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、水浴鍋、低溫離心機。
試劑的組成和配制
試劑一：液體4mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加4mL蒸餾水溶解。
試劑三：液體4mL×1瓶，4℃保存。（如出現沉淀可以70-80℃加熱溶解）
試劑四：液體10mL×1瓶，4℃避光保存。（如出現沉淀可以70-80℃加熱溶解）
試劑五：液體10mL×1瓶，4℃避光保存。
工作液：臨用前根據用量將試劑四和試劑五以1:1的比例混合。
樣品處理
新鮮土樣自然風干或37度烘箱風干，過30~50目篩。
測定操作表
空白管 | 對照管 | 測定管 | |
風干土樣（g） | 0.02 | 0.02 | |
蒸餾水（μL） | 40 | ||
試劑一（μL） | 40 | 40 | |
試劑二（μL） | 40 | 40 | 40 |
混勻后，25℃反應1h | |||
試劑三（μL） | 40 | 40 | 40 |
充分震蕩30S，10000rpm，4℃，離心10min | |||
上清液（μL） | 70 | 70 | 70 |
工作液（μL） | 140 | 140 | 140 |
充分混勻，靜置3min后測定540nm處吸光值，分別記為A空白管、A對照管、A測定管?？瞻坠苤灰鲆还?，每個測定管需設一個對照管。 | |||
計算公式
a. 使用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標準曲線：y = 1.5562x+ 0.0088，R2 = 0.996；x為標準品濃度（μmol/mL），y為吸光值（A標準管-A空白管）。
酶活單位定義：每g土樣每天還原1μmol NO2ˉ 的量為一個酶活力單位。
S-NiR（μmol /d /g土樣）=[A空白管-(A測定管-A對照管) -0.0088]÷1.5562×V標÷W÷T
= 0.617×[A空白管-(A測定管-A對照管) -0.0088]÷W
T：反應時間，1h=1/24d；V標：標準液體積，0.04mL；W：樣本質量，g。
b. 使用96孔板測定的計算公式如下
標準曲線：y = 0.7781x+ 0.0088，R2 = 0.996；x為標準品濃度（μmol/mL），y為吸光值（A標準管-A空白管）。
酶活單位定義：每g土樣每天還原1μmol NO2ˉ 的量為一個酶活力單位。
S-NiR（μmol /d /g土樣）=[A空白管-(A測定管-A對照管) -0.0088]÷0.7781×V標÷W÷T
= 1.234×[A空白管-(A測定管-A對照管) -0.0088]÷W
T：反應時間，1h=1/24d；V標：標準液體積，0.04mL； W：樣本質量，g。
注意事項
配制好的工作液3天內使用完。
若吸光值超過1.5，將上清液進行適當的稀釋后再加入工作液顯色，并在計算公式中乘以稀釋倍數。
嚴格控制顯色時間，否則會對結果有影響。
標準曲線線性范圍為0.03μmol/mL-1.5μmol/mL。
A空白管-（A測定管-A對照管）線性范圍為0.02-1.5。
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