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| 參考價 | ¥60.00-¥100.00 |
| 規(guī)格 | 100管/96樣 | 100元 | 15 盒可售 |
| 規(guī)格 | 50管/48樣 | 60元 | 15 盒可售 |
產(chǎn)品簡介
| 產(chǎn)地 | 國產(chǎn) | 規(guī)格 | 100管/96樣、50管/48樣 |
| 級別 | 其他 |
本網(wǎng)站銷售的所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
AS6321369 | 雙縮脲法蛋白含量測試盒(比色法) | 100管/96樣 |
AS6321369 | 雙縮脲法蛋白含量測試盒(比色法) | 50管/48樣 |
測定意義:
樣品可溶性蛋白質(zhì)含量常常用于酶活性計算。此外,可溶性蛋白質(zhì)含量也用于食品等質(zhì)量分析。
測定原理:
強堿性溶液中,雙縮脲與CuSO4形成紫色絡(luò)合物;紫色絡(luò)合物顏色的深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比,而與蛋白質(zhì)分子量及氨基酸成分無關(guān),故可用來測定蛋白質(zhì)含量。該方法測定范圍為1~10mg蛋白質(zhì),適用于蛋白質(zhì)濃度高的樣品,尤其是動物材料。
自備儀器和用品:
離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、移液器和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存。
標準品:液體1mL×1瓶,5 mg/mL,4℃保存。
樣品中可溶性蛋白質(zhì)提?。?/p>
液體樣品:澄清無色液體樣品可以直接測定。
組織樣品:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液(自備,根據(jù)需要選用酶提取緩沖液或者蒸餾水或者生理鹽水))
冰浴勻漿,8000g,4℃離心10min,取上清,即待測液。(動物樣品常常需要稀釋)
細菌、真菌:按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。
測定操作:
1. 分光光度計/酶標儀預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到540 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 空白管:取0.5mL EP管,加入40μL蒸餾水,200μL試劑一,混勻后室溫靜置15 min,取200μL于微量玻璃比色皿/96孔板,540nm比色,記為A空白管。
3. 標準管:取0.5mL EP管,加入40μL標準液,200μL試劑一,混勻后室溫靜置15 min,取200μL于微量玻璃比色皿/96孔板,540 nm比色,記為A標準管。
4. 測定管:取0.5mL EP管,加入40μL待測液,200μL試劑一,混勻后室溫靜置15 min,取200μL于微量玻璃比色皿/96孔板,540nm比色,記為A測定管。
注意:空白管和標準管只需測定一次。
樣品中蛋白質(zhì)濃度計算公式:
C待測(mg/mL)= C標準管×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)
=5×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)
注意事項:
1.樣品蛋白濃度須在1~10mg/ml范圍內(nèi),低于1mg/ml不能用此法,高于10mg/ml須做相應(yīng)稀釋。因此測定前用1~2個樣做預(yù)實驗,確保蛋白濃度在1~10mg/ml范圍內(nèi)。
2.待測樣品蛋白提取可用生理鹽水、雙蒸水或不含蛋白的PBS提取。該法受硫酸銨、Tris緩沖液干擾,提取液中應(yīng)不含這些物質(zhì);否則改用BCA蛋白質(zhì)含量測定試劑盒。



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