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產品簡介
| 產地 | 國產 | 產品新舊 | 全新 |
LAD2 人肥大細胞說明書
一、細胞基本信息
細胞全稱:LAD2 人肥大細胞系
細胞來源:人急性髓系白血病患者外周血分離建立的永生化肥大細胞系
細胞特性:懸浮或半貼壁生長,保留成熟肥大細胞核心表型,表達FcεRI高親和力IgE受體、受IgE交聯刺激后可穩(wěn)定釋放組胺、β-己糖胺酶等炎癥介質,是目前過敏相關研究常用的人源肥大細胞模型。
推薦應用場景:IgE介導的過敏反應機制研究、肥大細胞活化抑制劑藥物篩選、炎癥因子釋放通路驗證。
二、培養(yǎng)基配方
該細胞對營養(yǎng)要求較高,常規(guī)RPMI 1640基礎培養(yǎng)基需針對性補充關鍵組分:
基礎培養(yǎng)基:RPMI 1640 含L
血清添加:10% 熱滅活胎牛血清,提前篩選適配的穩(wěn)定血清批次
核心添加劑:重組人IL-3 10 ng/mL、重組人SCF(干細胞因子)100 ng/mL
可選添加:雙抗1%,避免支原體污染
三、標準傳代操作流程
培養(yǎng)條件:37℃、5% CO?飽和濕度培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)
傳代密度:嚴格維持細胞接種密度在 ?2×10^5 個/mL?,最高培養(yǎng)密度不超過1×10^6 個/mL,密度過高會導致細胞活率驟降、表型丟失
傳代操作:無需消化,直接在超凈臺內吸取部分細胞懸液,用預熱的新鮮培養(yǎng)基按1:2~1:3的比例稀釋分瓶,補加新鮮培養(yǎng)基后放回培養(yǎng)箱即可。
換液策略:每2~3天半量換液,離心收集細胞后棄去一半舊培養(yǎng)基,加入等量預熱新鮮培養(yǎng)基重懸,避免全量換液導致細胞自分泌生長因子丟失,引發(fā)細胞凋亡。
四、關鍵質控與注意事項
活率要求:正常培養(yǎng)狀態(tài)下細胞活率應長期維持在90%以上,活率低于80%時需檢查SCF、IL-3活性是否失效,或血清批次是否適配。
表型驗證:每10代需通過流式細胞術驗證FcεRI、CD117(c-Kit)的陽性表達率,確認細胞未發(fā)生表型漂移。
活化實驗標準操作:開展IgE介導脫顆粒實驗時,提前用特異性IgE抗體致敏細胞過夜,次日加入抗原交聯刺激,30分鐘后檢測上清中β-己糖胺酶釋放率,正常活化組釋放率應達到總酶活的30%~50%。
禁忌:絕對不能使用不含SCF的培養(yǎng)基長期培養(yǎng)細胞,會在3~5天內快速引發(fā)細胞凋亡、肥大細胞核心功能表型丟失。
腸平滑肌細胞包裝:5 × 105次方(1ml)
表皮角化細胞包裝:5 × 105次方(1ml)
表皮角化細胞包裝:5 × 105次方(1ml)
表皮角化細胞包裝:5 × 105次方(1ml)
腸動脈內皮細胞包裝:5 × 105次方(1ml)
腸動脈內皮細胞包裝:5 × 105次方(1ml)
腸動脈內皮細胞包裝:5 × 105次方(1ml)
成骨細胞包裝:5 × 105次方(1ml)
成骨細胞包裝:5 × 105次方(1ml)
成骨細胞包裝:5 × 105次方(1ml)
成人表皮角化細胞包裝:5 × 105次方(1ml)
成人真皮成纖維細胞包裝:5 × 105次方(1ml)
大隱靜脈平滑肌細胞包裝:5 × 105次方(1ml)
大隱靜脈平滑肌細胞包裝:5 × 105次方(1ml)
大隱靜脈平滑肌細胞包裝:5 × 105次方(1ml)
大隱靜脈平滑肌細胞包裝:5 × 105次方(1ml)
單核細胞包裝:5 × 105次方(1ml)
膽道癌組織源性原代細胞包裝:5 × 105次方(1ml)/1ml
肺癌組織源性原代細胞包裝:5 × 105次方(1ml)/1ml
肺成纖維細胞包裝:5 × 105次方(1ml)
肺成纖維細胞包裝:5 × 105次方(1ml)
肺成纖維細胞包裝:5 × 105次方(1ml)
肺成纖維細胞包裝:5 × 105次方(1ml)
肺大動脈內皮細胞包裝:5 × 105次方(1ml)
肺大動脈內皮細胞包裝:5 × 105次方(1ml)
肺大動脈平滑肌細胞包裝:5 × 105次方(1ml)
肺大動脈平滑肌細胞包裝:5 × 105次方(1ml)
肺大靜脈內皮細胞包裝:5 × 105次方(1ml)
肺大靜脈內皮細胞包裝:5 × 105次方(1ml)
肺大靜脈平滑肌細胞包裝:5 × 105次方(1ml)
肺大靜脈平滑肌細胞包裝:5 × 105次方(1ml)
肺動脈成纖維細胞包裝:5 × 105次方(1ml)
肺動脈成纖維細胞包裝:5 × 105次方(1ml)
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移動站:LAD2 人肥大細胞
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