BIOLOG公司的碳源利用方法,利用微生物對不同碳源進行呼吸代謝的差異,針對每一類微生物篩選 95種不同碳源或其它化學物質(zhì),固定于96孔板上(A1孔為陰性對 照),配合四唑類氧化還原染料,接種菌懸液后培養(yǎng)一定時間,通過檢測微生物細胞利用不同碳源進行呼吸代謝過程中產(chǎn)生的氧化還原物質(zhì) 與顯色物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)而導致的顏色變化(吸光度)以及由于微生物生長造成的濁度差異(濁度),生成特征指紋圖譜,與標準菌株圖譜數(shù)據(jù)庫進行比對,即可得出最終鑒定結(jié)果。
鑒定細菌時,全部基于呼吸代謝導致的顯色反應(yīng)原理。
鑒定酵母時,A-C行基于顯色反應(yīng)原理,D-H行基于濁度差異原理。
鑒定絲狀真菌時,系統(tǒng)自動為95種碳源測定兩套數(shù)據(jù),即顯色反應(yīng)和濁度。
市場上大部分基于表型鑒定的細菌鑒定分析系統(tǒng)普遍需要做革蘭氏染色等前處理,容易選錯鑒定板而無法獲 得準確結(jié)果。美國BIOLOG公司憑借其高通量表型芯片平臺,優(yōu)選出71種碳源和23種化學敏感物質(zhì),將革 蘭氏陰性細菌和陽性細菌用同一塊板進行鑒定,大大簡化鑒定步驟,增加了數(shù)據(jù)庫的擴展性,提高鑒定靈敏度和 準確性。
GEN III好氧細菌數(shù)據(jù)庫2017年初新增180種好氧細菌數(shù)據(jù)庫,總好氧細菌庫達到1568種,含革蘭氏陰性 細菌800種,比上一版本增加174種;革蘭氏陽性細菌768種,比上一版本增加6種。
好氧細菌鑒定更加簡單:不需革蘭氏染色,無需做氧化酶、三糖鐵和過氧化物酶實驗,一個細胞濃度,一塊 板,一個培養(yǎng)溫度,無需附加試驗。
技術(shù)參數(shù):
1.主要用途:用于各種與微生物相關(guān)的領(lǐng)域包括制藥、食品、化妝品等常見的好氧細菌、厭氧菌、酵母和霉菌等微生物的鑒定。
2.鑒定原理:以碳源利用及化學物質(zhì)敏感性檢測為原理,用于鑒定的反應(yīng)數(shù)量95種。
3.工作條件:
3.1電源要求: 220-240V AC(交流),50Hz
3.2環(huán)境溫度:18℃—30℃
3.3相對濕度:20%—85%
4.儀器技術(shù)指標:
4.1系統(tǒng)數(shù)據(jù)庫部分:
4.1.1數(shù)據(jù)庫容量大于2900種(taxa),包含四大類數(shù)據(jù)庫,其中Gen III好氧細菌數(shù)據(jù)庫1568種(革蘭氏陰性好氧菌800種,革蘭氏陽性好氧菌768種),其它可選數(shù)據(jù)庫有:厭氧菌361種,酵母菌267種,絲狀真菌710種。幾乎涵蓋了所有常見的人類、動物、植物病原菌以及食品、藥品和環(huán)境微生物。
4.1.2 BIOLOG絲狀真菌數(shù)據(jù)庫(FF),可自動鑒定包括臨床、工業(yè)、農(nóng)業(yè)及環(huán)境中常見青霉(153種)、曲霉(89種)、刺盤孢霉(18種)、鐮刀霉(79種)、木霉及其它種等708種絲狀真菌。為與傳統(tǒng)的真菌形態(tài)學鑒定相結(jié)合,BIOLOG提供近1000多張精美的宏觀和顯微圖片供用戶參考比對,以獲得更為精確的結(jié)果。
4.1.3 BIOLOG在食品、化妝品和制藥工業(yè)領(lǐng)域提供大量的常見致病菌數(shù)據(jù)庫,包括沙門氏菌(15種)、李斯特菌(7種)、大腸桿菌(8種,含阪崎腸桿菌和E.coli O157:H7)、葡萄球菌(43種好氧,2種厭氧)、彎曲菌、假單孢菌(52種)、弧菌(23種)、梭菌(60種)、志賀氏菌(4種)、耶爾森氏菌(11種)、鏈球菌(61種,含豬鏈球菌)、金黃桿菌屬(32種)等,用于食品、藥品及化妝品行業(yè)致病微生物鑒定、工業(yè)應(yīng)用微生物研究、質(zhì)量控制及產(chǎn)品研發(fā)等。
4.1.4 BIOLOG在植物病原菌鑒定方面,可鑒定常見的植物病原菌達到258種,如假單孢菌 (130種),伯克霍爾德菌(13種)、黃單孢菌 屬(81種)、果膠桿菌屬(14種)、食酸菌屬 (7種)、短小桿菌(5種)、根瘤菌屬(4 種)、歐文氏解淀粉菌等,數(shù)百種植物致病細菌及數(shù)百種的植物病原真菌。
4.1.5可鑒定23種分枝桿菌(Mycobacterium)。
4.1.6可鑒定放線桿菌共22種,其中革蘭氏陽性好氧放線菌8種,厭氧放線菌14種。
4.2系統(tǒng)操作性能:
4.2.1好氧細菌使用Gen III鑒定板,無需進行革蘭氏染色、氧化酶和三糖鐵等預(yù)測試工作,直接將培養(yǎng)好的純種配制菌懸液后定量接種至鑒定板即可。
4.2.2鑒定時間:細菌2-22小時,酵母24-72小時,霉菌3-7天。
4.2.3系統(tǒng)維護保養(yǎng)簡單,維護成本低。
4.3系統(tǒng)軟件功能:
4.3.1可生成用戶自定義數(shù)據(jù)庫。構(gòu)建系統(tǒng)數(shù)據(jù)庫之外新發(fā)現(xiàn)的菌株數(shù)據(jù)庫,便于將來菌株的聚類分析和溯源分析。
4.3.2 用于鑒定的反應(yīng)數(shù)量多達95種,鑒定結(jié)果特異性強、分離度大、擴充空間巨大。
4.3.3 的算法分析模型,用相似性(SIM)和距離 (DIS)等參數(shù)來判定鑒定結(jié)果,綜合考慮了結(jié)果與標準數(shù)據(jù)庫的匹配程度及距離大小,更加真實地反應(yīng)了鑒定結(jié)果的好壞。
4.3.4 數(shù)據(jù)管理軟件模塊,用戶可對數(shù)據(jù)文件進行備份、篩選、合并、瀏覽、生成聚類圖、編輯及輸入或輸出。
4.3.5設(shè)定用戶使用權(quán)限,保證數(shù)據(jù)安全,數(shù)據(jù)安全性符合美國FDA的21CFR PART11要求。
4.4系統(tǒng)硬件部分
4.4.1讀數(shù)儀:美國原產(chǎn)雙波長讀數(shù)儀,常用濾光片490nm,590nm和750nm,可容納6個濾光片。
4.4.2濁度計:OD值和透光率雙刻度指針式顯示,電池供電。
4.4.3八通道連續(xù)加液器:Ovation電動八通道連續(xù)加液器,加液量范圍25-1250uL,精確度±3.5%(125uL),準確度0.8%(125uL)。
4.5 認可
4.5.1 GB/T28978_2012馬鈴薯環(huán)腐病菌檢疫鑒定方法。
4.5.2 SN/T 2601-2010 植物病原細菌常規(guī)檢測規(guī)范。
5.系統(tǒng)配置:
5.1整套主機包含ELX808BLG讀數(shù)儀1臺、21907濁度計1臺、八通道加液器1支、Microlog 3基礎(chǔ)軟件1套和Retrospect數(shù)據(jù)管理軟件1套。
5.2數(shù)據(jù)庫:配好氧細菌數(shù)據(jù)庫、厭氧菌數(shù)據(jù)庫、酵母菌數(shù)據(jù)庫、絲狀真菌數(shù)據(jù)庫,鑒定板(用于菌種的篩選),培養(yǎng)基,接種液,其它耗材等。


















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