【??參數(shù)信息】（AF350標(biāo)記膜聯(lián)蛋白V）

英文名稱：Annexin V, Alexa Fluor 350 conjugate；AF350-Annexin V Conjugate；AF350 Annexin V

中文名稱：Alexa Fluor 350標(biāo)記的膜聯(lián)蛋白V；AF350-Annexin V 標(biāo)記物

Ex (nm)：343

Em (nm)：441

分子量：~36000

溶劑：Water

純度：≥95%

儲存條件：-20℃避光干燥

生產(chǎn)廠商：西安強化生物科技

【簡單概述】（AF350標(biāo)記膜聯(lián)蛋白V）

膜聯(lián)蛋白（Annexins）是一類鈣離子依賴性磷脂膜結(jié)合蛋白家族。

其中，膜聯(lián)蛋白V（Annexin V）作為細胞凋亡研究的關(guān)鍵工具，能夠特異性檢測細胞表面暴露的磷脂酰絲an酸（PS）——這一特征不僅是細胞凋亡的標(biāo)志，也存在于其他形式的細胞死亡過程中。

在細胞凋亡過程中，磷脂酰絲an酸會從細胞膜內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)至外側(cè)。這種細胞表面PS的暴露是凋亡早期/中期的普遍指征，其可檢測時間早于細胞形態(tài)學(xué)變化的發(fā)生。

目前，細胞活性的監(jiān)測可通過多種參數(shù)實現(xiàn)，而基于膜聯(lián)蛋白V-熒光染料偶聯(lián)物（Annexin V-dye conjugates）的PS外翻檢測法已成為凋亡監(jiān)測的金標(biāo)準(zhǔn)。

XFD350標(biāo)記的膜聯(lián)蛋白V偶聯(lián)物與Alexa Fluor 350-Annexin V具有相同的分子結(jié)構(gòu)，是目前的熒光標(biāo)記膜聯(lián)蛋白V探針之一，廣泛應(yīng)用于細胞凋亡監(jiān)測。

優(yōu)勢

高靈敏度與特異性：通過結(jié)合外翻的PS，高效檢測早期凋亡細胞。

非放射性檢測：提供安全、簡便的凋亡檢測方法，無需放射性物質(zhì)。

快速簡便的操作流程：染色與分析步驟簡單，實驗操作時間短。

廣泛的應(yīng)用范圍：適用于多種細胞類型及實驗條件。

【AF350 Annexin V是如何分析免疫細胞在炎癥或自身免疫疾病中的凋亡途徑的？】

（一）檢測原理

PS外翻：

正常細胞中PS分布于細胞膜內(nèi)側(cè)；凋亡早期，PS外翻至膜表面。AF350標(biāo)記的Annexin V在鈣離子存在下與PS高親和力結(jié)合，發(fā)射藍色熒光（激發(fā)/發(fā)射波長約346/442 nm）。

區(qū)分凋亡階段：

常與膜不透性染料聯(lián)用：

早期凋亡：Annexin V?/PI?

晚期凋亡/壞死：Annexin V?/PI?

活細胞：Annexin V?/PI? 。

（二）實驗步驟（以流式細胞術(shù)為例）

細胞制備：

分離病變組織或外周血中的免疫細胞，用預(yù)冷PBS洗滌后重懸于含Ca2?的結(jié)合緩沖液。

染色孵育：

加入AF350 Annexin V和PI，避光室溫孵育15分鐘。

流式檢測：

使用流式細胞儀，AF350熒光通過紫外或紫色激光通道檢測，PI通過FL2或FL3通道檢測。

【相關(guān)試劑】

AF790疊氮化物

AF405疊氮化物

AF405 PEG4 DBCO

AF405 C5馬來酰亞胺

剛果紅 CAS 573-58-0

生物su-X，琥珀酰亞胺酯

AF488-刀豆蛋白A(ConA)探針

ReadiCleave XFD647 AML-NHS 酯

Amplite 比色法醛類定量試劑盒 藍色

Amplite 熒光法甲醛定量試劑盒 綠色熒光

PerCP-iFluor 700 PerCP-iFluor 700 串聯(lián)染料

ATTO 488 acid ATTO 488酸 1443553-08-9

APC-XFD700 Tandem APC-XFD 700 串聯(lián)染料

APC-iFluor 720 Tandem APC-iFluor 720 串聯(lián)染料

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本試劑僅適用于科研實驗，敬請知悉。