試劑中英文名稱：DyLight 649 labeled Lycopersicon Esculentum

儲存：-20℃干燥避光保存至少1年，冰袋運輸。

產(chǎn)地：陜西西安

應(yīng)用：糖生物學(xué)，免疫熒光

熒光顏色：紅色

糖特異性：[GlcNAc]1-3, N-Acetylglucosamine

純度：≥95%

一、背景描述：（番茄凝集素DyLight 649）

Lycopersicon esculentum (Tomato) Lectin (LEL, TL), DyLight 649, is a bright deep-red/far-red LEL-fluorophore conjugate.

The tomato lectin LEL is widely used as marker of blood vessels and microglial cells in rodents and in neuroscience research.

It is a valuable tool in studies of rodent tumor angiogenesis and the tracing of neovascular development in xenograft models and brain research.

LEL-DyLight 649 can be applied directly to tissue sections, or it can be introduced through intravascular perfusion for fluorescence detection.

番茄凝集素 （LEL， TL），DyLight 649，是一種明亮的深紅色/遠紅 LEL-熒光團偶聯(lián)物。

番茄凝集素 LEL 被廣泛用作嚙齒動物血管和小膠質(zhì)細胞的標志物以及神經(jīng)科學(xué)研究。

它是研究嚙齒動物腫瘤血管生成以及異種移植模型中新生血管發(fā)育追蹤和大腦研究的寶貴工具。

LEL-DyLight 649 可直接應(yīng)用于組織切片，也可以通過血管內(nèi)灌注引入熒光檢測。

LEL is a very stable single-subunit glycoprotein containing ～50 percent arabinose and galactose and may form multimeric aggregates in solution.

It is provided at a 1 mg/mL concentration in 10 mM HEPES, 0.15 M NaCl, pH 7.5, 0.08% sodium azide, 0.1 mM Ca2+. If a precipitate forms upon long-term storage, warm to 37°C.

LEL 是一種非常穩(wěn)定的單亞基糖蛋白，含有約 50% 的阿拉伯糖和半乳糖，可在溶液中形成多聚體聚集體。

它以 1 mg/mL 濃度在 10 mM HEPES、0.15 M NaCl、pH 7.5、0.08% 、0.1 mM Ca2+ 中提供。如果長期儲存時形成沉淀物，請加熱至 37°C。

基本特點：

（1）使用傳統(tǒng) Cy5/深紅濾光片組檢測到非常明亮的 DyLight 649 偶聯(lián)物，Ex/Em：655/670 nm

（2）應(yīng)用：免疫熒光、糖生物學(xué)

（3）糖特異性：[GlcNAc] 1,3-N-乙酰氨基葡萄糖

（4）抑制/洗脫糖：幾丁質(zhì)水解物

（5）血型特異性：非特異性

（6）未偶聯(lián)凝集素分子量：71 KDa。

（7）免疫熒光工作濃度：5–20 μg/mL

二、熒光檢測與染色問題（番茄凝集素DyLight 649）

（一）熒光參數(shù)

激發(fā)波長：655 nm，發(fā)射波長：670 nm（遠紅光），可用 Cy5/深紅濾光片 檢測。

染料結(jié)合量優(yōu)化，幾乎不含游離熒光素，但仍需避光操作以防淬滅。

（二）常見問題與解決

低染色效率：

可能因反應(yīng)溫度過低（需≥37°C）或時間不足，優(yōu)化孵育條件。

高背景信號：

未充分沖洗血管（增加PBS洗滌次數(shù)）；

游離染料殘留（用層析柱純化或增加含 0.5% Tween-20的PBS 洗滌）；

非特異性結(jié)合（用 5% BSA 封閉組織切片）。

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