【??參數(shù)信息】
英文名稱:Calcein,AM,Ultrapure Grade
中文名稱:鈣黃綠素乙酰甲酯
CAS NO:148504-34-1
分?式:C46H46N2O23
分?量:994.86
Emission (Em):515
Excitation(Ex):485
作?靶點(diǎn):Fluorescent Dye
純度:95%+
廠家:西安強(qiáng)化生物
【簡單概述】(鈣黃綠素乙酰甲酯)
Calcein AM is a cell-permeable dye that,upon entering live cells,is cleaved by intracellular esterases,leaving membrane-impermeant calcein,a fluorescent indicator with absorption and emission maxima of 494 and 517 nm,respectively.
It can be used as an indicator of cell viability,cell-cell communication, cytotoxicity,or changes in intracellular calcium,fluoride,iron,or mercury.1,2
As calcein is a substrate for multidrug resistance-associated protein 1 (MRP1) and multidrug resistance protein 3(MDR3, P-glycoprotein 3), calcein AM is used to study these proteins and their regulation.
鈣黃綠素 AM 是一種細(xì)胞滲透性染料,進(jìn)入活細(xì)胞后,被細(xì)胞內(nèi)酯酶裂解,留下膜不滲透性鈣黃綠素,這是一種熒光指示劑,吸收和發(fā)射分別為 494 和 517 nm。
它可用作細(xì)胞活力、細(xì)胞間通訊、細(xì)胞毒性或細(xì)胞內(nèi)鈣、氟化物、鐵或汞變化的指標(biāo)。
由于鈣黃綠素是多重耐藥相關(guān)蛋白 1 (MRP1) 和多重耐藥蛋白 3 (MDR3,P-糖蛋白 3) 的底物,因此鈣黃綠素 AM 用于研究這些蛋白質(zhì)及其調(diào)節(jié)。
【操作步驟】
(一)儲備溶液配制
鈣黃綠素及其衍生物通常以凍干粉形式提供,需用無水DMSO復(fù)溶為約1 mg/mL的儲存液(如50 µg染料加入50 µL DMSO)。
工作液需用緩沖液(如HBSS)進(jìn)一步稀釋。鈣黃綠素-AM水溶液易水解,建議當(dāng)日使用。
(二)實(shí)驗(yàn)操作流程
1.移除培養(yǎng)基,用無血清緩沖液洗滌細(xì)胞一次
2.加入Calcein AM工作液,37°C孵育30-60分鐘
3.更換為HHBS或含陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑的緩沖液
4.可選擇以下任一檢測方式檢測熒光強(qiáng)度
配備FITC濾光片的熒光顯微鏡
配置藍(lán)色激光器和5300/30 nm濾光片的流式細(xì)胞儀
熒光酶標(biāo)儀(激發(fā)/發(fā)射=490/525 nm,截止515 nm)
【相關(guān)試劑】
Calbryte 520 AM
西諾沙星-KLH 綴合物
Calcein UltraGreen AM
Cal-520N, potassium salt
Cinoxacin-BSA Conjugate
鈣離子熒光探針Cal520N,AM
Calcein AM/PI Double Stain Kit
Calcein Red, AM 鈣黃綠素紅(紅色)
Celltracker CM-DiI 細(xì)胞膜橙紅色熒光探針
Pluronic® F-127, Cell Culture Tested 細(xì)胞培養(yǎng)級
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本試劑僅適用于科研實(shí)驗(yàn),敬請知悉。












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