【??參數(shù)信息】
英文名稱：Annexin V-APC/7-AAD Apoptosis Detection Kit 細胞凋亡檢測試劑盒
中文名稱：Annexin V-APC/7-AAD細胞凋亡檢測試劑盒
檢測設(shè)備：流式細胞儀或熒光顯微鏡。
規(guī)格：30T、100T
純度：≥95%
儲存條件：-20℃避光干燥
生產(chǎn)廠商：西安強化生物科技
【簡單概述】
Annexin V-APC/7-AAD細胞凋亡檢測試劑盒是一款用來檢測細胞凋亡的試劑盒，可以用流式細胞儀進行檢測。
本試劑盒包含APC標(biāo)記的Annexin V，用來檢測早期細胞凋亡；以及7-AAD，用來檢測壞死細胞。
本試劑盒的工作原理如下：
Phosphotidylserine，PS是一種帶負(fù)電荷的磷脂。在正常細胞中，PS位于細胞膜內(nèi)面，但當(dāng)?shù)蛲鲩_始后，PS在磷脂雙分子層中的不對稱分布逐漸消失并轉(zhuǎn)移到細胞膜表面，從而暴露在細胞外環(huán)境中。
膜聯(lián)蛋白V（Annexin V）是一種分子量約35kDa的鈣離子依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能輕易結(jié)合PS，并具有高度的親和性。
因此，通過Annexin V與PS的結(jié)合與否來判斷凋亡發(fā)生。
另外，7-AAD的引入能輔助區(qū)分凋亡早期細胞和晚期凋亡或壞死細胞。
7-AAD作為一種活細胞排斥探針，不能穿透具有完整細胞膜的正常細胞或凋亡早期細胞，但能穿透喪失細胞膜完整性的凋亡晚期細胞或壞死細胞，從而將細胞核染紅。
因此，將Annexin V-APC與7-AAD聯(lián)合使用時，呈現(xiàn)結(jié)果為：正常細胞（Annexin V-APC-/7-AAD-），早期凋亡細胞；晚期凋亡細胞和壞死細胞同時呈現(xiàn)雙陽性。
【常見問題解答】
1） Q：Annexin V/7-AAD凋亡試劑盒能夠用于檢測人或其他動物的細胞凋亡情況？
A：可以，因Annexin V特異性結(jié)合PS，而PS在不同種屬間無差異。
2） Q：貼壁細胞做凋亡用yi酶消化對細胞膜有損傷？
A：低濃度yi酶消化，輕柔吹打貼壁細胞2～3次，4℃，1000rpm離心5min， 處理得當(dāng)?shù)脑挘?yi酶造成損傷可以控制在 5%以內(nèi)，在有對照組的情況下對實驗結(jié)果不會造成明顯影響。
也可以使用非常溫和的Accutase消化酶，能較大程度的保護細胞膜完整性。
3） Q：貼壁細胞可先染7-AAD然后再消化嗎？這樣是否可減少由于消化液造成的細胞膜損傷而染上7-AAD的誤差？
A：先加 7-AAD不僅染色是否每組都均勻充分很難判斷， 而且7-AAD本身對細胞也是有毒性的， 對實驗結(jié)果影響會比yi酶大，不建議這樣做。
4） Q：為什么只能用不含 EDTA的yi酶消化貼壁細胞，用含 EDTA的yi酶消化細胞對結(jié)果有什么影響？
A：因Annexin V是鈣離子依賴性的磷脂結(jié)合蛋白，EDTA是一種金屬螯合劑。因此EDTA的加入會影響Annexin V活性，進而影響結(jié)果。
5） Q：Annexin V-APC/7-AAD凋亡試劑盒是否適合熒光顯微鏡檢測？
A：本試劑盒經(jīng)流式細胞儀檢測能得到理想的染色結(jié)果。對于熒光顯微鏡未經(jīng)內(nèi)部檢測，理論上若熒光顯微鏡配有適當(dāng)?shù)臑V片是可行的。
【相關(guān)試劑】
FITC-Con A FITC
Auramine O金胺O
Ziehl-Neelsen Method
Kinyoun Cold Method
Auramine O Method
Cell Staining Buffer
Trypsin (0.25%),Phenol Red
Trypsin-EDTA(0.25%),Phenol Red
AccutaseTM Cell Detachment Solution
Annexin V-APC/7-AAD Apoptosis Detection Kit
Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection Kit
Annexin V-Alexa Fluor 488/PI Apoptosis Detection Kit
以上資料由西安強化生物科技有限公司xxn整理！
本試劑僅適用于科研實驗，敬請知悉。
采購中心
