【??參數(shù)信息】

英文名稱：Myoglobin from Equine Skeletal Muscle

中文名稱：肌紅蛋白

CAS NO：100684-32-0

分子量：~17.6 kDa

鐵含量：0.25-0.32%

外觀：深棕色粉末

溶解性：溶于水（10 mg/ml）

純度：≥95%

儲存條件：-20℃避光干燥

生產(chǎn)廠商：西安強(qiáng)化生物科技

【簡單概述】

肌紅蛋白是一種單鏈血紅素蛋白，來源于馬骨骼肌，以凍干粉形式供應(yīng)。

分子量約為17-17.6 kDa，由153個(gè)氨基酸殘基組成，不含二硫鍵或自由巰基（-SH基團(tuán)）。

結(jié)構(gòu)包含8個(gè)右旋α螺旋區(qū)域（A-H），通過無序或隨機(jī)卷曲區(qū)域連接，血紅素輔基位于E和F螺旋之間，幾乎被疏水氨基酸包裹。

血紅素中心的Fe2?含6個(gè)配位鍵：4個(gè)結(jié)合原卟啉IX的吡咯環(huán)氮原子，1個(gè)結(jié)合F8組an酸殘基，可逆結(jié)合氧氣或其他小分子。

【使用方法】

（一）實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備

樣品復(fù)溶（針對凍干粉）

溶解方法：取適量凍干粉，加入去離子水或緩沖液，濃度為 10 mg/mL。靜置10分鐘以上，反復(fù)顛倒或輕柔搓動助溶，直至溶解形成紅棕色澄清溶液。

注意事項(xiàng)：若為試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品（如凍干管裝），需加入 0.5 mL樣本-稀釋液，溶解后恢復(fù)至標(biāo)注濃度。

緩沖液選擇

推薦使用 pH 7.0的脫氣磷酸鹽緩沖液（如0.1 mol/L），以避免氧化干擾。

特殊實(shí)驗(yàn)（如光譜研究）需使用MOPS緩沖液（3-(N-嗎啉代)丙磺酸緩沖液，pH 7.4）。

（二）特定實(shí)驗(yàn)步驟（根據(jù)研究目的）

1. 制備脫氧肌紅蛋白（DeoxyMb）

步驟：

將溶解后的肌紅蛋白溶液置于厭氧環(huán)境中，通入 氮?dú)猓∟2）脫氧10分鐘。

加入 固體連二亞*（Na2S2O4，5 mg/5 mL溶液） ，繼續(xù)通氮?dú)?0分鐘，還原Fe3?至Fe2?狀態(tài)。

目的：獲得脫氧形式，用于氧結(jié)合能力研究。

2. 制備碳氧肌紅蛋白（MbCO）

步驟：

在脫氧肌紅蛋白溶液中通入 一氧化碳（CO）氣體20分鐘，使CO與血紅素Fe2?結(jié)合。

應(yīng)用：用于CO釋放分子（CORMs）或配體結(jié)合實(shí)驗(yàn)。

3. 鐵含量與純度驗(yàn)證

鐵含量標(biāo)準(zhǔn)：0.25–0.32%或約0.3%。

純度檢測：通過 SDS-PAGE 驗(yàn)證，純度需≥95%。

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本試劑僅適用于科研實(shí)驗(yàn)，敬請知悉。