【??參數(shù)信息】

英文名稱：Fluorescein di(β-D-galactopyranoside)

中文名稱：熒光素二(β-D-吡喃半乳糖苷)

CAS NO：17817-20-8

分子式：C32H32O15

分子量：656.59

狀態(tài)：淺黃色固體

Emission (Em) ：520

Excitation (Ex)：488

摩爾吸光系數(shù)：80000 cm-1M-1(0.1N NaOH)

光量子產(chǎn)率：0.95(0.1N NaOH)

純度：≥95%

儲存條件：-20℃避光干燥

生產(chǎn)廠商：西安強化生物科技

【簡單概述】

FDG（Fluorescein di(β-D-galactopyranoside)）是一種人工合成的熒光底物，其結(jié)構(gòu)由熒光素核心通過糖苷鍵連接兩個β-D-吡喃半乳糖基團組成。

被β-半乳糖苷酶水解后會釋放出熒光素，激發(fā)和發(fā)射波長分別為490/514nm，產(chǎn)生的熒光與酶活力成正比。

FDG主要用于以β-半乳糖苷酶（LacZ）作為報告基因的轉(zhuǎn)染細(xì)胞內(nèi)基因表達水平的檢測。

FDG能進入活細(xì)胞，用于哺乳動物細(xì)胞和革蘭氏陰性菌中通過流式細(xì)胞術(shù)來檢測β-半乳糖苷酶活性。

FDG也能用于顯色法的方式來檢測β-半乳糖苷酶活性，因為酶代謝產(chǎn)物-熒光素呈現(xiàn)大的摩爾吸光系數(shù)，但是，基于熒光素的測定法比基于吸光度的測定法靈敏度高幾個數(shù)量級。

【使用方法】

體外研究

衰老相關(guān) β-半乳糖苷酶 (SA-βG) 活性測定。

將細(xì)胞 (每孔 5×103 個細(xì)胞) 培養(yǎng)于 96 孔板中。

用 PBS 清洗三次。

在含有 2% 甲醛和 0.2% 戊二醛中固定 5 分鐘。

用 PBS 清洗三次。

將 100 μL 反應(yīng)緩沖液 (即不含 X-Gal 的染色液) 加入每孔中。

每孔加入 10 μL 2 mM FDG，在 37°C 避光條件下孵育 24 小時，無需 CO2 供應(yīng)。

使用熒光計 (Ex/Em = 485/535 nm) 測量熒光素?zé)晒狻?/span>

【相關(guān)試劑】

iFluor594 Phalloidin

iFluor 555 Phalloidin

Prostaglandin A3

Prostaglandin E3

Prostaglandin A2

碘化乙啶(HI),Ethidium Iodide

Alexa Fluor 405-Streptavidin

Alexa Fluor 647-Streptavidin

Ethidium Homodimer 1 (EthD-1)

BAPTA，Tetrasodium Salt鈣螯合劑

EGTA AM，CalciumChelator鈣螯合劑

Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit

Aminoethoxyvinylglycine (AVG) Hydrochloride

Indo-1,AM,Cell Permeant 鈣離子熒光探針 112926-02-0

Fluo-8 Potassium Salt, Cell lmpermeant 鈣離子熒光探針

以上資料由西安強化生物科技有限公司xxn整理！

本試劑僅適用于科研實驗，敬請知悉。