【參數(shù)信息】
英文名稱：EvaGreen (20× in Water)
激發(fā)波長：500 nm
發(fā)射波長：530 nm
純度：≥95%
儲存條件：-20℃避光干燥
生產(chǎn)廠商：西安強化生物科技
【簡單概述】
EvaGreen (20× in Water)是新一代雙鏈DNA（dsDNA）結(jié)合染料，可實時定量PCR（qPCR）、高分辨率熔解曲線（HRM）分析及數(shù)字PCR（ddPCR）等分子生物學應用。
其 "20×水溶液" 指濃縮儲存液，使用時需稀釋至工作濃度（通常為1×）。
化學本質(zhì)：綠色熒光核酸染料，激發(fā)波長≈500 nm，發(fā)射波長≈530 nm（結(jié)合DNA時）。
結(jié)構特點：由兩個單體染料分子通過柔性間隔臂連接成二聚體，形成的"按需釋放"（release-on-demand）構象。
作用機制
1. "按需釋放"動態(tài)結(jié)合模型
EvaGreen的作用機制基于其構象轉(zhuǎn)換：
無DNA時：染料分子呈閉合環(huán)狀構象，無DNA結(jié)合活性，熒光背景極低。
有DNA時：構象轉(zhuǎn)為開放線性狀態(tài)，嵌入dsDNA小溝，熒光強度增強。
動態(tài)平衡：PCR擴增過程中，新生成的dsDNA持續(xù)觸發(fā)染料構象轉(zhuǎn)換，實現(xiàn)活性染料的按需供應。
2. 抑制PCR抑制效應的原理
飽和濃度使用：因構象轉(zhuǎn)換機制，EvaGreen可在高濃度下使用，提供強信號的同時不抑制Taq酶活性。
避免染料重分布 ：高濃度下染料不易從小擴增子遷移至大擴增子，確保多重PCR中多個擴增子的溶解峰清晰可辨。
【應用領域】
（一）實時定量PCR（qPCR）
高靈敏度檢測低豐度靶標，適用于基因表達分析。
兼容快速PCR程序（縮短延伸時間）。
（二）高分辨率熔解曲線（HRM）分析
飽和染料濃度下可區(qū)分 單堿基突變（SNP） 、甲基化差異。
試劑盒案例：TIANGEN HRM Kit直接集成EvaGreen，簡化操作并提升信噪比。
（三） 數(shù)字PCR（ddPCR）
行業(yè)標準染料：經(jīng)驗證適用于液滴數(shù)字PCR的DNA結(jié)合染料。
直接定量線粒體DNA，無需核基因參照，減少誤差。
（四）其他分子檢測技術
等溫擴增：實時監(jiān)測擴增進程。
細胞活力檢測：選擇性標記死細胞。
【相關試劑】
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本試劑僅適用于科研實驗，敬請知悉。
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