【參數(shù)信息】
英文名稱:XL1-Blue Electrocompetent cell 大腸桿菌電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞
中文名稱:XL1-Blue 電擊感受態(tài)細(xì)胞
熱穩(wěn)定性:不可熱激轉(zhuǎn)化;操作時需嚴(yán)格控溫(冰?。?/span>
機械敏感性:避免劇烈震蕩、氣泡產(chǎn)生,輕柔操作以防細(xì)胞膜損傷
使用限制:DNA加入量≤1/10體積;適用電擊轉(zhuǎn)化
純度:≥95%
儲存條件:-20℃避光干燥
生產(chǎn)廠商:西安強化生物科技
【簡單概述】
XL1-Blue Electrocompetent cell 電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞是一種通過特殊工藝處理大腸桿菌XL1-Blue菌株得到的工程化細(xì)胞, 用于電擊轉(zhuǎn)化,不適用于熱激轉(zhuǎn)化。
其核心特性包括:
高轉(zhuǎn)化效率:經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測,適用于文庫構(gòu)建等高效克隆需求 。
基因型優(yōu)勢:
recA1 和 endA1 突變:減少DNA重組并消除核酸內(nèi)切酶活性,提高插入片段穩(wěn)定性和質(zhì)粒DNA純度 。
hsdR17 突變:使EcoK限制系統(tǒng)失活,保護外源DNA不被切割 。
lacIqZΔM15 基因:支持藍白斑篩選,便于重組質(zhì)粒鑒定 。
四環(huán)素抗性:由F′附加體上的 Tn10 基因提供,用于篩選轉(zhuǎn)化子 。
適用范圍:僅用于電擊轉(zhuǎn)化。
【注意事項】
1) 感受態(tài)細(xì)胞保存在-80℃以下,不可反復(fù)凍融和放置時間過長,以免降低感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率。
2) 整個轉(zhuǎn)化操作,嚴(yán)格根據(jù)相應(yīng)溫度及無菌條件要求進行。
3) 加入DNA的體積不應(yīng)大于感受態(tài)體積的1/10。DNA不純或存在鹽、乙醇、蛋白及緩沖液等污染時,會導(dǎo)致轉(zhuǎn)化效率急劇下降。
4) 為確保轉(zhuǎn)化效率,整個操作過程應(yīng)盡量輕柔,并保持低溫。
5) 電擊感受態(tài)細(xì)胞加入電擊杯應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡,氣泡會增加弧光放電風(fēng)險。
6) 電擊杯里的離子可增加溶液的電導(dǎo),增大在含有細(xì)胞和DNA的溶液中產(chǎn)生電流和弧光放電的風(fēng)險。
7) 若轉(zhuǎn)化大質(zhì)粒或想獲得較高轉(zhuǎn)化效率,推薦使用高純質(zhì)粒提取試劑盒提取質(zhì)粒。質(zhì)粒增大一倍,轉(zhuǎn)化效率下降一個數(shù)量級。
8) 對于連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化:在轉(zhuǎn)化前乙醇沉淀DNA后用適量TE緩沖液重懸產(chǎn)物,保證DNA濃度不超過100ng/μl。過高濃度連接產(chǎn)物或過大體積連接產(chǎn)物會降低轉(zhuǎn)化效率,增加弧光放電的風(fēng)險。
9) 混入質(zhì)粒時應(yīng)輕柔操作,吸取感受態(tài)細(xì)胞時不可用孔徑過小的槍頭(普通200μl槍頭應(yīng)剪去槍頭尖0.6cm)。避免用力過猛,以免剪切力過大損傷細(xì)胞膜,降低轉(zhuǎn)化效率。轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少最終用于涂板的菌量。
10) 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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本試劑僅適用于科研實驗,敬請知悉。












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