【參數(shù)信息】
英文名稱:H-Leu-AMC Hydrochloride salt
中文名稱: L-亮an酸7-氨基-4-甲基肉桂醛
CAS NO:66447-31-2
分子式:C16H21ClN2O3
分子量:324.80
狀態(tài):固體
激發(fā)波長(zhǎng):380 nm。
發(fā)射波長(zhǎng):460 nm。
純度:≥95%
儲(chǔ)存條件:-20℃避光干燥
生產(chǎn)廠商:西安強(qiáng)化生物科技
【簡(jiǎn)單概述】
H-Leu-AMC Hydrochloride salt(化學(xué)名:L-Leucine 7-amido-4-methylcoumarin hydrochloride)是一種熒光底物。
其核心結(jié)構(gòu)由L-亮an酸(L-Leucine)與7-amino-4-methylcoumarin, AMC通過(guò)酰胺鍵連接而成,并以鹽酸鹽形式穩(wěn)定存在。
作用機(jī)制:熒光底物的酶學(xué)原理
H-Leu-AMC 的核心作用機(jī)制是作為亮an酸氨基肽酶和氨基肽酶M的特異性底物。
通過(guò)酶解反應(yīng)釋放熒光信號(hào),實(shí)現(xiàn)酶活性的高靈敏度檢測(cè)。
(一)酶解反應(yīng)過(guò)程
底物結(jié)構(gòu):由L-亮an酸的羧基與AMC的氨基形成酰胺鍵。
酶特異性識(shí)別:亮an酸氨基肽酶(LAP)識(shí)別底物N端的L-亮an酸殘基,水解酰胺鍵 。
熒光釋放:水解后釋放游離的7-氨基-4-甲基香豆su(AMC),該物質(zhì)在380 nm激發(fā)光下發(fā)射460 nm藍(lán)色熒光。
(二)熒光信號(hào)檢測(cè)的優(yōu)勢(shì)
高靈敏度:AMC的熒光量子產(chǎn)率高,可檢測(cè)低至納摩爾級(jí)的酶活性。
動(dòng)態(tài)范圍廣:適用于連續(xù)監(jiān)測(cè)或終止法。
特異性強(qiáng):主要響應(yīng)亮an酸特異性氨基肽酶,較少受其他蛋白酶干擾 。
(三)動(dòng)力學(xué)特性
快速結(jié)合-緩慢解離:底物與酶結(jié)合迅速,解離速率慢,便于捕獲酶-底物復(fù)合物的動(dòng)態(tài)變化。
Km值優(yōu)化:設(shè)計(jì)時(shí)平衡疏水性與熒光團(tuán),確保酶解 。
【安全操作指南】
個(gè)人防護(hù):佩戴合適的防護(hù)眼鏡、手套等。
存儲(chǔ)條件:溫度、濕度要求,遠(yuǎn)離火源、氧化劑等。
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