【參數(shù)信息】
英文名稱:Dehydroergosterol (DHE)
中文名稱:脫氫麥角甾醇
CAS NO:516-85-8
分子式:C28H42O
分子量:394.63
狀態(tài):固體
溶解性: 溶于乙醇、DMF、DMSO、乙醇:PBS(pH 7.2)(1:2)
儲(chǔ)存條件:-20℃避光干燥
生產(chǎn)廠商:西安強(qiáng)化生物科技
【簡(jiǎn)單概述】
Dehydroergosterol (DHE)是一種天然存在的熒光甾醇類似物,在生物體內(nèi)具有多種基本性質(zhì)。
它是一種膽gu醇的熒光類似物,能夠模擬膽gu醇的許多特性,包括與膽gu醇結(jié)合蛋白結(jié)合的能力,以及在細(xì)胞膜中的分布和動(dòng)態(tài)行為。
DHE 能夠被脂蛋白吸收,并在培養(yǎng)細(xì)胞中容易被吸收,與內(nèi)源性甾醇共分布。
此外,DHE 在細(xì)胞膜中可以誘導(dǎo)液態(tài)有序結(jié)構(gòu)的形成,并影響膜的流動(dòng)性和穩(wěn)定性 。
DHE 還具有抗氧化特性,能夠保護(hù)細(xì)胞免受氧化應(yīng)激的損傷,并在鈣和磷的代謝中起關(guān)鍵作用 。
【應(yīng)用】
(1)用脫氫麥角甾醇(DHE)進(jìn)行染色,方法如下:
DHE溶于乙醇配置成5mM儲(chǔ)存液,充入氮?dú)夂?,置?80℃凍存。
細(xì)胞染色,先制備DHE/MCD標(biāo)記液,脈沖式標(biāo)記1-2min,緩沖培養(yǎng)基清洗后,直接成像或于37℃脈沖追蹤30min。
(2) 用脫氫麥角甾醇(DHE)進(jìn)行染色,方法如下:
DHE溶于乙醇配置成5mM儲(chǔ)存液,充入氮?dú)夂螅糜?86℃凍存。
50%密度的單層細(xì)胞鋪后用含5%無(wú)脂蛋白血
清和12.5μM DHE的Hams F-12培養(yǎng)基過(guò)夜培養(yǎng)。
標(biāo)記細(xì)胞消化、充分清洗后,重懸在含5%無(wú)脂蛋白血清的Hams F-12培養(yǎng)基。
細(xì)胞重新鋪板在多聚賴氨酸標(biāo)記的35mm培養(yǎng)皿中,繼續(xù)培養(yǎng)16-20h后進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
DHE用熒光顯微鏡的UV區(qū)【335/20nm激發(fā)濾片,365nm長(zhǎng)帶通二向色濾片,405/40nm發(fā)射濾片】進(jìn)行觀察。
【相關(guān)試劑】
Fura-FF AM,Cell Permeant
BAPTA,Tetrapotassium Salt
BIO-PEG標(biāo)記的Asp天冬an酸
PropidiumMonoazide(PMA)
BMPO(Spin trapping reagent)
Fluo-4?Pentapotassium?Salt
BCP-T.A. (Ferroptosis inducer)
PTIO一氧化氮清除劑/NO清除劑
BAPTA,Tetrasodium Salt鈣螯合劑
Decylubiquinone (mPTP inhibitor)
BAPTA AM,Calcium Chelator鈣螯合劑
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