【參數(shù)信息】

CAS NO：9035-81-8

同義名：Trypsin Inhibitor, Soybean ；Kunitz Trypsin Inhibitor, Tia1, STI and SBTI；

來源：大豆

分子量：21,500 ± 800 Da

pH：7.0

等電點(diǎn)：4.5

外觀：凍干粉

溶解性：溶于水或磷酸鹽緩沖液（10mg/ml）

純度：≥95%

儲(chǔ)存條件：-20℃避光干燥

生產(chǎn)廠商：西安強(qiáng)化生物科技

【簡單概述】

Trypsin Inhibitor, Soybean 是大豆中的天然蛋白質(zhì)類抗?fàn)I養(yǎng)因子，主要分為兩類：

Kunitz型（KTI） ：分子量約20 kDa，含216個(gè)an基酸，特異性抑制yi蛋白酶。

Bowman-Birk型（BBI） ：分子量約10 kDa，含110個(gè)氨基酸，可同時(shí)抑制yi蛋白酶和yi凝乳蛋白酶。

熱敏感性：天然狀態(tài)下具有活性，加熱、強(qiáng)酸/堿處理可使其變性失活。

作用機(jī)制

與蛋白酶按 1:1摩爾比 形成復(fù)合物，通過切割抑制劑上的精an酸-異亮an酸鍵實(shí)現(xiàn)抑制。

對(duì)胰蛋白mei的抑制為 不可逆結(jié)合，對(duì)yi凝乳蛋白酶為可逆結(jié)合。

特異性抑制絲an酸蛋白mei，但對(duì)胃蛋白mei、金屬蛋白mei等無影響。

【使用場景與操作流程】

（一）細(xì)胞培養(yǎng)（無血清體系）

場景：替代血清終止yi蛋白酶消化，適用于干細(xì)胞、原代細(xì)胞等敏感細(xì)胞。

步驟：

消化細(xì)胞：吸棄培養(yǎng)基 → 用DPBS清洗 → 加入yi蛋白酶/EDTA覆蓋細(xì)胞 → 37℃孵育1-2分鐘至細(xì)胞變圓。

終止消化：吸棄yi蛋白酶 → 加入大豆yi酶抑制劑溶液。

配制方法：粉末用無菌PBS溶解，使用前稀釋50倍至0.1 mg/mL。

收集細(xì)胞：輕敲培養(yǎng)皿使細(xì)胞脫落 → 離心重懸于新鮮培養(yǎng)基。

關(guān)鍵參數(shù)：

抑制劑用量需匹配yi蛋白酶活性。

溶液需過濾除菌（0.22 μm濾膜）后使用。

（二）生化實(shí)驗(yàn)（蛋白酶抑制）

場景：重組蛋白純化、酶活性測(cè)定、防止蛋白降解。

步驟：

溶液配制：

儲(chǔ)備液：1-5 mg/mL（水或PBS溶解）。

工作濃度：10-100 μg/mL（依實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整）。

加入體系：在蛋白提取液或反應(yīng)體系中直接加入抑制劑（終濃度≤0.1 mg/mL）。

注意事項(xiàng)：

避免與金屬蛋白mei抑制劑共用。

控制pH在6.0-10.0以確?；钚浴?/span>

（三）食品工業(yè)應(yīng)用

場景：防止魚肉制品軟化，改善肉質(zhì)口感。

方法：

添加至加工原料，用量需通過抑制活性測(cè)定優(yōu)化。

需配合熱處理（如80℃以上）降低豆類自身抗?fàn)I養(yǎng)因子活性。

【相關(guān)試劑】

Liproxstatin-1

iFluor 647 alkyne

iFluor 405 hydrazide

iFluor 405 maleimide

OVA Peptide 141312-45-0

(1S,3R)-RSL3 (GPx4 inhibitor)

BCP-T.A. (Ferroptosis inducer)

Decylubiquinone (mPTP inhibitor)

Equivalent toAlexa Fluor 488 NHS ester

Trypsin Inhibitor, Soybean 

Alexa Fluor 488 Carboxylic Acid Equivalent

SYBR Green I Nucleic Acid Gel Stain 核酸凝膠染料

Rosetta-gami 2(DE3) Chemically Competent Cell

SYBR Green I Nucleic Acid Stain (PCR Grade, 10,000×)

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本試劑僅適用于科研實(shí)驗(yàn)，敬請(qǐng)知悉。