【參數(shù)信息】
英文名稱:SYTO 9 Green Fluorescent Nucleic Acid Stain
中文名稱:SYTO 9綠色熒光核酸染料
分子式:305.42 g/mol
化學(xué)名稱:雙[1-甲基-4-(3-磺丙基)-3H-吲哚]五甲川菁碘化物。
狀態(tài):橙色固體
溶解性:易溶于 DMSO(二甲基亞砜)
純度:≥95%
儲(chǔ)存條件:-20℃避光干燥
生產(chǎn)廠商:西安強(qiáng)化生物科技
【簡(jiǎn)單概述】
SYTO 9綠色熒光核酸染料是一款細(xì)胞核和染色體復(fù)染劑,具細(xì)胞膜滲透性。
SYTO 9高親和結(jié)合DNA(以及RNA),一旦結(jié)合后呈現(xiàn)增強(qiáng)的熒光信號(hào),用藍(lán)光激發(fā)(發(fā)射波長(zhǎng)485nm),發(fā)綠色熒光(激發(fā)分別是498nm(DNA)和501nm(RNA))。
SYTO 9能滲透進(jìn)入原核和真核細(xì)胞膜,普遍用作核復(fù)染劑。
【使用方法】
在LAMP實(shí)驗(yàn)中的使用方法
工作液配制
稀釋原則:10,000×儲(chǔ)存液需用 無(wú)菌去離子水或緩沖液(如TE緩沖液)稀釋至終濃度 0.4 μM(即終濃度0.4 mM)。
示例:1 μL儲(chǔ)存液加入999 μL緩沖液,混勻后加入LAMP反應(yīng)體系。
LAMP反應(yīng)體系優(yōu)化
終濃度:0.4 μM SYTO 9(過(guò)高可能抑制擴(kuò)增,過(guò)低降低靈敏度)。
擴(kuò)增條件:63℃恒溫?cái)U(kuò)增 50分鐘,實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)熒光信號(hào)(FAM通道)。
注意事項(xiàng)
避免抑制劑:禁用含磷酸鹽的緩沖液或殘留洗滌劑的器皿(影響染色效率)。
防淬滅:全程避光操作,縮短曝光時(shí)間。
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