試劑名稱:膜電位熒光探針RH237
儲(chǔ)存:-20℃干燥避光保存至少1年,冰袋運(yùn)輸。
產(chǎn)地:西安強(qiáng)化生物
CAS:83668-91-1
分子式:C29H40N2O3S
分子量:496.71
一、描述與基本特性:
膜電位熒光探針RH237是一種快速反應(yīng)電位探針,主要用于神經(jīng)元的功能成像,還用于監(jiān)測細(xì)胞膜電位,突觸活動(dòng)和神經(jīng)元離子通道活性。
苯乙烯基染料通常的吸收或激發(fā)光譜藍(lán)移為20 nm,發(fā)射光譜藍(lán)移為80 nm。
【作用機(jī)制】
(一)膜電位檢測原理
快速響應(yīng)機(jī)制:膜電位變化(ΔΨ)→ 染料分子內(nèi)電荷重排 → 熒光強(qiáng)度線性變化(去極化增強(qiáng),超極化減弱)。
信號靈敏度:響應(yīng)時(shí)間在亞毫秒級,適合監(jiān)測動(dòng)作電位等快速電活動(dòng)。
選擇性依據(jù):特異性結(jié)合膜磷脂,定位準(zhǔn)確,背景干擾低。
(二)光譜特性優(yōu)化
激發(fā)/發(fā)射波長:
乙醇中:Exmax=532nm,Emmax=777nm(紅移光譜減少自發(fā)熒光)
甲醇中:Exmax=550nm,Emmax=786nm(溶劑依賴性)
藍(lán)移現(xiàn)象:細(xì)胞膜中激發(fā)峰≈512nm,發(fā)射峰≈697nm,需調(diào)整檢測濾光片。
(三)功能優(yōu)勢
低光毒性:長波長激發(fā)(>530nm)減少細(xì)胞損傷。
多場景兼容:適用于共聚焦顯微鏡、熒光壽命成像。
跨模型適用:神經(jīng)元、心肌細(xì)胞、線粒體膜電位同步監(jiān)測。
二、使用方法
步驟詳解:
母液配制:DMSO溶解至1-10mM,分裝避光保存(避免反復(fù)凍融)。
工作濃度:1-5μM(需預(yù)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化,過高濃度可能淬滅)。
加載時(shí)間:室溫孵育10-30分鐘,隨后緩沖液沖洗減少背景熒光。
動(dòng)態(tài)監(jiān)測:建議使用高速相機(jī)(>500fps)捕捉電位瞬變。
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