試劑名稱:碘化乙啶(HI),Ethidium Iodide
儲存:-20℃干燥避光保存至少1年,冰袋運輸。
產(chǎn)地:西安強化生物
CAS:211566-66-4
分子式:C25H28IN3
分子量:497.41
一、描述與基本特性:
碘化乙啶(HI),Ethidium Iodide是一種菲啶鎓類核酸染色劑,屬于中等親脂性熒光染料。
與DNA結合后,激發(fā)波長(Ex)518 nm,發(fā)射波長(Em)600 nm,發(fā)出橙紅色熒光。
熒光強度與DNA結合量成正比,適用于定量分析。
應用領域
(一)核酸染色與細胞分析
作用機制:嵌入DNA雙螺旋堿基對,結合后熒光強度增強(游離態(tài)熒光微弱)。
細胞通透性:可穿透哺乳動物細胞膜,染色細胞質(zhì)、細胞核,線粒體與核仁也可能著色。
(二)微生物學檢測
革蘭氏陽性菌選擇性染色:
在含革蘭氏陰性菌的環(huán)境中,特異性染色幾乎全部革蘭氏陽性菌。
需經(jīng)EDTA預處理以滲透細菌細胞壁,結合DNA后顯熒光。
應用示例:評估巨噬細胞對細菌的吞噬能力 。
(三)其他生物分析
檢測核酸結合蛋白、酵母、霉菌;
分析多核苷酸結構、核酸擴增;
測量膜電位/跨膜電位。
二、常見問題
能否用于哺乳動物細胞核染色?
→ 不推薦。可能污染其他細胞器(如線粒體),建議選用專用核染料(如DAPI)。
染色失敗的可能原因?
→ ① 細菌未充分透化(革蘭氏陰性菌需EDTA預處理);② 光照導致淬滅;③ DMSO濃度過高影響活性。
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用于科研相關領域,不能用于人體實驗!
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