&使用方法

儲(chǔ)存液（工作液）的制備：

RH-237溶于DMSO配制成1mg/ml儲(chǔ)存液（~2mM），置于+4℃避光保存。

于實(shí)驗(yàn)當(dāng)天用Calcium-Tyrode's solution稀釋到工作濃度，DMSO殘留不超過(guò)0.4%。

k 光學(xué)標(biāo)測(cè)（Optical Mapping）：

ZF心臟用10 μM blebbistatin 孵育至少60min以降低運(yùn)動(dòng)偽影。

成像前心臟用8 μM電位探針RH-237 室溫孵育15min。

試劑信息

英文名稱(chēng)：RH237膜電位熒光探針

苯乙烯基染料RH237

CAS NO：83668-91-1

分子式：C29H40N2O3S

分子量：496.71

狀態(tài)：固體

激發(fā)波長(zhǎng)：528nm

發(fā)射波長(zhǎng)：782nm

溶解性： 溶于DMSO

純度：≥95%

純度：≥95%

儲(chǔ)存條件：-20℃避光干燥

苯乙烯基染料RH237 是一種快速反應(yīng)電位探針，主要用于神經(jīng)元的功能成像，還用于監(jiān)測(cè)細(xì)胞膜電位，突觸活動(dòng)和神經(jīng)元離子通道活性。

苯乙烯基染料通常的吸收或激發(fā)光譜藍(lán)移為20 nm，發(fā)射光譜藍(lán)移為80 nm。

&注意事項(xiàng)

工作濃度優(yōu)化

建議初始濃度 1–5 μM，但需根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型調(diào)整：

神經(jīng)元：2–3 μM（過(guò)高濃度易導(dǎo)致背景熒光）；

心肌細(xì)胞/線粒體：4–5 μM（需增強(qiáng)信噪比）。

避坑指南：

梯度測(cè)試：0.5–10 μM范圍篩選合適濃度。

添加0.1% BSA減少非特異性結(jié)合。

溶解與配制誤區(qū)

正確方法：

先用無(wú)水DMSO配制成1–10 mM母液，再稀釋至緩沖液（避免直接用水溶解）；

母液分裝后-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融（≤3次）。

常見(jiàn)錯(cuò)誤：

使用含血清培養(yǎng)基直接稀釋?zhuān)ㄑ宓鞍赘蓴_探針結(jié)合）；

未過(guò)濾除菌（細(xì)菌污染導(dǎo)致熒光異常）。

染色條件優(yōu)化

孵育時(shí)間：室溫避光15–30分鐘（過(guò)久易內(nèi)化至胞質(zhì)）；

洗滌步驟：用無(wú)染料緩沖液沖洗3次，減少背景信號(hào)。

特殊樣本注意：

神經(jīng)元：染色后靜置10分鐘再成像（平衡膜分布）；

線粒體：聯(lián)合Mitotracker驗(yàn)證共定位。

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本試劑用于科研領(lǐng)域，其他用途概不適用！