試劑名稱：TO-PRO-1 Green Fluorescent Dye熒光染料

儲(chǔ)存：-20℃干燥避光保存至少1年，冰袋運(yùn)輸。

產(chǎn)地：西安強(qiáng)化生物

CAS：157199-59-2

一、描述與基本特性：

TO-PRO-1 Green Fluorescent Dye熒光染料的分子式為：C24H29I2N3S，分子量為645.38 。

該染料是一種單菁類熒光染料，具有一個(gè)帶有兩個(gè)甲基的噻吩環(huán)、一個(gè)帶有兩個(gè)甲基的吡啶環(huán)以及一個(gè)連接的苯環(huán)和一個(gè)帶有兩個(gè)甲基的乙基鏈 。

此外，其結(jié)構(gòu)中包含一個(gè)帶有兩個(gè)氮原子的噻吩基團(tuán)和一個(gè)帶有兩個(gè)氮原子的吡啶基團(tuán)，通過一個(gè)碳碳雙鍵相連，末端連接著一個(gè)帶有兩個(gè)甲基的三甲基銨離子和兩個(gè)碘離子 。

TO-PRO-1的熒光性質(zhì)，在生物熒光成像中應(yīng)用較廣。

二、作用機(jī)制

嵌入結(jié)合：平面結(jié)構(gòu)插入雙鏈DNA（dsDNA）堿基對(duì)間，形成穩(wěn)定復(fù)合物。

靜電增強(qiáng)：季銨基團(tuán)通過靜電作用結(jié)合DNA磷酸骨架，提高親和力。

熒光激活：游離態(tài)因分子內(nèi)旋轉(zhuǎn)無熒光；結(jié)合DNA后構(gòu)象固定，熒光增強(qiáng)數(shù)百倍（"熒光開關(guān)"效應(yīng)）。

三、常見問題與解決方案

問題：熒光信號(hào)弱

原因：染料淬滅或膜損傷不足

解決方案：全程避光；增設(shè)陽性對(duì)照

問題：非特異性染色

原因：濃度過高或孵育過長

解決方案： 優(yōu)化濃度至1 µM

問題：多色實(shí)驗(yàn)干擾

原因：光譜重疊

解決方案：改用遠(yuǎn)紅通道染料（如TO-PRO-3）

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