使用POSITISIL® ODS-1 5um 4.6X250mm色譜柱，參照《中國藥典》高效液相色譜法對決明子提取物進行含量測定，檢測大黃酚、橙黃決明素，可滿足實驗要求。

對照品溶液的制備取大黃酚對照品、橙黃決明素對照品適量，精密稱定，加無水乙醇-乙酸乙酯(2∶1)混合溶液制成每1ml含大黃酚30μg、橙黃決明素20μg的混合溶液，即得。

供試品溶液的制備 取本品粉末(過三號篩)約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，加熱回流2小時，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液25ml，蒸干，加稀/鹽酸30ml，置水浴中加熱水解1小時，立即冷卻，用三氯jia烷振搖提取4次，每次30ml，合并三氯jia烷液，回收溶劑至干，殘渣用無水乙醇-乙酸乙酯(2∶1)混合溶液使溶解，轉(zhuǎn)移至25ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

測定法  分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。

色譜條件

色譜柱：POSITISIL® ODS-1 5um 4.6X250mm

流動相：A 乙腈   B 0.1%磷酸溶液

             B conc. 60%（0-15min）

                60→10%（15-30min）

                 0%（30-40min）

流 速：1 mL/min

柱 溫：25 ℃

波 長：UV 284nm

進樣量：10μL

理論板數(shù)按橙黃決明素峰計算應(yīng)不低于3000。