Pierce 蛋白 A Plus 瓊脂糖由純化的天然蛋白 A 組成,該蛋白 A 以高密度共價(jià)固定到高質(zhì)量交聯(lián)的 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B) 上。在現(xiàn)有的許多各種形式固定化蛋白 A 親和樹(shù)脂中,本產(chǎn)品可提供通用的色譜特點(diǎn)組合,用于從哺乳動(dòng)物血清樣品中獲得高得率的全 IgG 和對(duì)全 IgG 進(jìn)行高純度純化。瓊脂糖微珠的物理和化學(xué)特性適用于多種親和純化系統(tǒng)。
Pierce 蛋白 A Plus 瓊脂糖的特點(diǎn):
?天然蛋白 A – 固定化蛋白 A 是從人、兔、豬、犬或貓血清中進(jìn)行多克隆 IgG 純化的理想選擇
? 瓊脂糖樹(shù)脂 – 支持物為交聯(lián)的 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B),這是蛋白親和純化方法較常用的樹(shù)脂
? 惰性且穩(wěn)定 – 的生產(chǎn)方法通過(guò)不帶電荷的抗浸出性共價(jià)鍵固定蛋白 A/G,因此非特異性結(jié)合較低且能夠多次使用而不降低得率
? 高容量 – 本款 Pierce 蛋白 A 瓊脂糖的 “Plus” 類型包含密集上樣量的固定化蛋白 A,提供大于 34 mg 人 IgG/mL 樹(shù)脂(約 16 至 17 mg 小鼠 IgG/mL 樹(shù)脂)的結(jié)合容量
Pierce 純化柱兼容主流自動(dòng)液相色譜系統(tǒng)或手動(dòng)注射器處理并直接連接 ?KTA™ 或 FPLC 系統(tǒng)(無(wú)需額外的連接器)。每件產(chǎn)品均隨附一個(gè)附件包,已預(yù)裝在純化柱上,與 Luer-Lok 注射器接頭或 1/16” 管配合使用。這些蛋白 A 純化柱可提供快速、簡(jiǎn)單、重復(fù)性好的色譜分離,并可再生,用于多種用途。
蛋白 A 是由多種菌株產(chǎn)生的細(xì)胞壁成分。蛋白為46.7kDa 的單鏈多肽,基本上不含碳水化合物。天然蛋白 A 包含四個(gè)高親和力 (Ka= 10^8/mol) 結(jié)合位點(diǎn),能夠與選定哺乳動(dòng)物物種的 IgG 類抗體 Fc 區(qū)相互作用。IgG 結(jié)合功能在 pH 值 8.2 時(shí),但在中性和生理緩沖液(pH 值 7.0 至 7.6)也可高效結(jié)合。
蛋白 A 是一種源自細(xì)菌的蛋白,對(duì)抗體(尤其是 IgG 類抗體)的 Fc 部分具有高親和力和特異性。與其替代品(蛋白G)相比,蛋白A對(duì)兔、豬、狗和貓的 IgG亞類結(jié)合力。蛋白A對(duì)人IgG也具有較高的結(jié)合力,但對(duì)IgG3的結(jié)合力很弱。蛋白 A 與小鼠 IgG1 的結(jié)合作用較弱,因此不推薦用于大多數(shù)包含該抗體同種型的應(yīng)用。
Pierce 蛋白 A Plus 瓊脂糖使用 Thermo Scientific AminoLink 偶聯(lián)化學(xué)法制備,該方法與傳統(tǒng)配體固定方法相比具有多項(xiàng)優(yōu)勢(shì)。AminoLink 固定后,瓊脂糖珠的糖單體與蛋白 A 上的天然賴氨酸殘基通過(guò)簡(jiǎn)單的酰胺鍵結(jié)合。與典型的溴化氰 (CNBr) 固定法不同,AminoLink 方法不引入任何新的化學(xué)基團(tuán),從而避免了可能導(dǎo)致的非特異性結(jié)合,并且形成基本不可逆的穩(wěn)定結(jié)合。所得的高結(jié)合容量樹(shù)脂在多輪抗體純化之后仍保留功能性固定化蛋白 A。
交聯(lián)的 6% 微珠的屬性
















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