樹突狀細(xì)胞快速成熟試劑盒

Dendritic Cell Rapid Maturation Kit

1.  誘導(dǎo)時間快：傳統(tǒng)樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)需要8天時間，使用本方案誘導(dǎo)成熟樹突狀細(xì)胞僅需要4天時間；2. 目的細(xì)胞百分比高：使用本方案誘導(dǎo)成熟樹突狀細(xì)胞流式結(jié)果顯示，終末細(xì)胞中約含有40%的成熟樹突狀細(xì)胞。

  產(chǎn)品簡介

   DC細(xì)胞是目前抗原提呈能力強(qiáng)的細(xì)胞，它在機(jī)體免疫流程中發(fā)揮著重要作用，但由于DC細(xì)胞在外周血中含量比較少， 如何快速大量獲得成熟樹突狀細(xì)胞成為免疫研究的一個重要課題。三一造血研發(fā)的DC細(xì)胞體外快速成熟試劑盒僅需3天 時間便能將單個核細(xì)胞（MNC）在體外誘導(dǎo)成樹突狀細(xì)胞，且含量高達(dá)40%。 

 產(chǎn)品特點

   1 誘導(dǎo)時間快：傳統(tǒng)樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)需要8天時間，使用本試劑盒誘導(dǎo)出成熟樹突狀細(xì)胞僅需3天時間；

   2 目的細(xì)胞百分比高：使用本試劑盒誘導(dǎo)成熟樹突狀細(xì)胞的流式結(jié)果顯示，終末細(xì)胞中含有40%的成熟樹突狀細(xì)胞。

試劑盒成份

   操作方法

   DC-I用150μL PBS溶解； DC-II用20μL PBS溶解； DC-III用10μL PBS溶解； DC-IV用50μL PBS溶解； DC-V用1mL PBS溶解。可將上述因子配制后置于-20°C冰箱保存，但建議現(xiàn)配現(xiàn)用 。

   1 D0 取250M個PBMC細(xì)胞，用50ml 1640培養(yǎng)液重懸，鋪于T-175培養(yǎng)瓶中，置于37℃、 5%CO2培養(yǎng)箱孵育2h；

   2 孵育2h后，輕晃T-175培養(yǎng)瓶，去懸浮細(xì)胞，用20mL的1640培養(yǎng)液洗滌兩次， 分別加入DC培養(yǎng)基100 mL， 4.6μL DC-I溶液(至其終濃度為500IU/mL)以及4μL DC-II溶液(至其終濃度為10ng/mL)， 同時加入5%的FBS， 繼續(xù)置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)；

   3 如需加入特異性抗原，可以于D2加入相應(yīng)的特異性抗原（終濃度20-80μg/mL）；

   4. D2 分別加入5μL DC-III溶液（至其終濃度為10ng/mL）,5μL DC-IV溶液（至其終濃度為500IU/mL），以及100μL  DC-V溶液（至其終濃度為1μg/mL）；

   5 D3 收集DC細(xì)胞于50mL離心管中用PBS離心洗滌3次，收獲DC細(xì)胞。 

   注意： 若初始的PBMC使用量非操作說明中250M的數(shù)量，請根據(jù)實際PBMC數(shù)量對試劑盒中各試劑的量做相應(yīng)調(diào)整。

  產(chǎn)品保存

   1 本產(chǎn)品需避光保存；

   2 DC培養(yǎng)基， DC-I與DC-IV置于2-8°C保存； DC-II， DC-III與DC-V置于-20°C保存；

   3 請于保質(zhì)期內(nèi)使用本產(chǎn)品，超過保質(zhì)期，請勿使用。