膠原酶IVSigma

膠原酶IVSigma

產(chǎn)品描述

Application

Collagenase from Clostridium histolyticum has been used:
• in the preparation of collagenase solution for the digestion of tumor tissues^[1]
• as a supplement in phosphate-buffered saline for the digestion of extirpated mesenteric fat tissue^[2]
• as a supplement in Roswell Park Memorial Institute-1640 medium (RPMI-1640) for the digestion of colon segments^[3]
• for the digestion of endometrium tissues^[4]
• in the preparation of enzyme A and enzyme B for the digestion of decapsulated testes^[5]
 

膠原酶已用于研究晚期糖基化終產(chǎn)物（AGE）所需的動脈組織的制備。該酶還與其他蛋白酶一起用于人腫瘤、小鼠腎、人腦、肺上皮以及許多其他組織的解聚。它還可有效用于肝臟和腎臟的灌注研究、胰腺的消化以及非實(shí)質(zhì)肝細(xì)胞的分離。該酶經(jīng)過了肝細(xì)胞釋放的適用性測試，針對每只大鼠肝臟的100 mL總體積中的濃度大約為1 mg/mL。

Biochem/physiol Actions

Clostridium histolyticum produces two classes of collagenases. Clostridial collagenases are more efficient than mammalian collagenases. It cleaves at multiple cleavage sites within the collagen triple helix. Clostridial collagenases is implicated in the bacterial invasion in gas gangrene.^[6]

從組織中進(jìn)行細(xì)胞的有效釋放需要膠原酶和中性蛋白酶的作用。每摩爾的膠原酶可被四克的鈣原子（Ca²⁺）所激活。培養(yǎng)濾液中被認(rèn)為至少含有7種分子量在68-130kDa之間的不同蛋白酶。該酶通常用于消化組織樣品中的結(jié)締成分以釋放單個(gè)細(xì)胞。膠原酶處理可引起某些細(xì)胞的死亡。通常，使用0.1至5 mg/mL的濃度用于消化。反應(yīng)時(shí)間可從15分鐘至數(shù)小時(shí)，并在不引起過多細(xì)胞死亡的情況下達(dá)到令人滿意的細(xì)胞解離效果。優(yōu)選含有鈣和BSA的Krebs Ringer緩沖液，而且Zn²⁺是活性所必需的。

每摩爾膠原蛋白酶被4g原子鈣活化。 它被乙二醇-雙（β-氨基乙基醚）-N，NN′,N′-四乙酸，β-巰基乙醇、谷胱甘肽、巰基乙酸和8-羥基喹啉抑制。

Caution

As supplied, this product is stable for 6 years at -20°C. There is no loss in FALGPA or protease activity in 30 days at 37°C, 50°C and -20°C. Solutions of crude collagenase are stable if frozen quickly in aliquots (at 10 mg/mL) and kept frozen at -20°C. Further freeze-thaw cycles will damage the solution. The product retains 100% activity over 7 hours when held on ice.

Unit Definition

一個(gè)膠原蛋白消化單元（CDU）從牛跟腱膠原蛋白中釋放的肽鏈量和1.0 μ亮氨酸，5小時(shí)，pH7.4,37℃，在鈣離子存在下的茚三酮顏色相同。一個(gè) FALGPA水解單元每分鐘，25℃，水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一個(gè)中性蛋白酶單元水解酪蛋白，產(chǎn)生顏色和1.0 μmole 酪氨酸每5小時(shí)，pH7.5,37℃下產(chǎn)生的相同。一個(gè)梭菌蛋白酶單元在DTT存在下，pH7.6,25℃，每分鐘水解1.0 μmole BAEE。

Preparation Note

溶液通常是在TESCA緩沖液（含有50mM TES、0.36mM氯化鈣，37℃時(shí)pH 7.4）中按1-2 mg/mL進(jìn)行制備。
該產(chǎn)品還含有梭菌蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶活性。

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      主營品牌：Sigma、Amresco、santa、hyclone、PeproTech、ABcam、life、Axygen、Corning、AMEKO、Merck、promega、GE、nunc等

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      試劑盒：ELISA試劑盒、免疫組化試劑盒、分子生物學(xué)試劑盒、細(xì)胞凋亡試劑盒    
      細(xì)胞培養(yǎng)：血清，專業(yè)培養(yǎng)基，常用傳統(tǒng)培養(yǎng)基   
      耗材：進(jìn)口、國產(chǎn)細(xì)胞培養(yǎng)耗材、普通實(shí)驗(yàn)耗材   
      生化試劑：*生化試劑、進(jìn)口分裝生化試劑、國產(chǎn)生化試劑    
      抗體：進(jìn)口原裝抗體、進(jìn)口分裝抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、一抗、二抗等

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