利用斑馬魚模型評價中樞神經(jīng)保護作用【評價原理】

中樞神經(jīng)損傷常表現(xiàn)為偏癱、失語、智力障礙或昏迷，甚至死亡。斑馬魚是一種與人類同源性較高的脊椎動物，大腦具有典型脊椎動物腦部形態(tài)學特征，髓鞘結構特征和少突膠質細胞分化過程與哺乳動物高度一致。而且斑馬魚生長發(fā)育周期短，神經(jīng)系統(tǒng)簡單，有利于開展中樞神經(jīng)保護劑的研究。霉酚酸嗎啉乙酯可以抑制斑馬魚神經(jīng)元軸突的生長，干擾神經(jīng)及細胞的遷移和導致發(fā)育畸形，使神經(jīng)元細胞凋亡。

經(jīng)過特異性熒光染色（凋亡細胞呈綠色），中樞神經(jīng)損傷的斑馬魚在腦和脊髓部位會布滿凋亡細胞，比正常斑馬魚多很多，可以明顯被觀察到。

利用斑馬魚模型評價中樞神經(jīng)保護作用【實驗方案】

我們將受測試斑馬魚分成三組，分別是正常對照組、模型對照組和服用中樞神經(jīng)保護劑組。其中正常對照組未經(jīng)任何處理，模型對照組與服用中樞神經(jīng)保護劑組都攝入了等量的霉酚酸嗎啉乙酯（霉酚酸嗎啉乙酯通過溶解到養(yǎng)魚用水中的方式攝入到斑馬魚體內）。服用中樞神經(jīng)保護劑組在攝入霉酚酸嗎啉乙酯的同時攝入還原型谷胱甘肽、養(yǎng)血清腦顆粒和安宮牛黃丸之類的中樞神經(jīng)保護劑。

服用中樞神經(jīng)保護劑一段時間后，我們對斑馬魚整體進行特異性熒光染色，觀察中樞神經(jīng)細胞的凋亡情況。

【結果展示】

圖1. 斑馬魚中樞神經(jīng)保護表型圖

黃色虛線區(qū)域為中樞神經(jīng)，綠色光點為凋亡細胞

可以看到，服用中樞神經(jīng)保護劑組的中樞神經(jīng)情況與正常對照組比較相似，沒有明顯的細胞凋亡。

【評價結論】

1.經(jīng)過每組30尾斑馬魚的對比實驗，服用中樞神經(jīng)保護劑組的中樞神經(jīng)情況與正常對照組相似，并未出現(xiàn)模型對照組大量凋亡細胞的情況。

2.本實驗證實了還原型谷胱甘肽、養(yǎng)血清腦顆粒和安宮牛黃丸具有明顯保護中樞神經(jīng)作用。