地塞米松檢測試劑盒

（酶聯(lián)免疫法）

 1 原理及用途

地塞米松檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測肌肉組織、牛奶等樣品中的地塞米松（Dexamethasone，DEX），試劑盒由預(yù)包被偶聯(lián)抗原的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物、抗體、標(biāo)準(zhǔn)品及其他配套試劑組成。檢測時(shí)，加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液，樣本中的地塞米松藥物和酶標(biāo)板上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競爭抗地塞米松藥物抗體，加入酶標(biāo)記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光度值與其所含地塞米松藥物含量成負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出樣本中地塞米松藥物的殘留量。

2 技術(shù)指標(biāo)

2.1 靈敏度：0.1ppb(ng/ml)

2.2 反應(yīng)模式：25℃，75min

2.3 檢測下限：

肌肉組織 0.2ppb，牛奶 0.5ppb，飼料 1ppb

3 組成

酶標(biāo)板 96孔

標(biāo)準(zhǔn)液：6瓶

高標(biāo)準(zhǔn)液（紅蓋）：1瓶

酶標(biāo)記物（紅蓋）1瓶

抗體工作液（藍(lán)蓋）1瓶

底物液A（白蓋）1瓶

底物液B（黑蓋）1瓶

終止液（黃蓋）1瓶

濃縮洗滌液（白蓋1瓶

復(fù)溶液（黃蓋）1瓶

說明書 1份

4 需要的器材和試劑

4.1 儀器：酶標(biāo)儀、打印機(jī)、均質(zhì)器 、氮?dú)獯蹈裳b置、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平（感量0.01g）

4.2 微量移液器：單道20µl-200µl，100µl-1000µl、多道300µl

4.3 試劑：乙酸乙酯、NaOH、正己烷

6 酶聯(lián)免疫試驗(yàn)步驟

6.1 編    號：將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔按序編號，每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行，并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。

6.2 加樣反應(yīng)：加標(biāo)準(zhǔn)品或樣本100µl/孔到各自的微孔中，然后加抗體工作液50µl/孔，輕輕振蕩5秒混勻，25℃避光反應(yīng)30分鐘。

6.3 洗    滌：將孔內(nèi)液體甩干，用工作洗滌液250µl/孔充分洗滌5次，每次間隔30秒，zui后用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破）。

6.4 加酶反應(yīng)：加酶標(biāo)記物100µl/孔，25℃避光反應(yīng)30分鐘。

6.5 洗    滌：同上

6.6 顯    色：加底物液A 50µl/孔，再加底物液B 50µl/孔，輕輕振蕩5秒混勻，25℃避光顯色15分鐘（若藍(lán)色過淺，可適當(dāng)延長反應(yīng)時(shí)間）。

6.7 終    止：每孔加入終止液50µl，輕輕振蕩混勻，終止反應(yīng)。

6.8 測吸光值：用酶標(biāo)儀于450nm處測定每孔吸光度值（建議用雙波長450/630nm）。測定應(yīng)在終止反應(yīng)后10分鐘內(nèi)完成。

7 結(jié)果分析

7.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制與計(jì)算

    以標(biāo)準(zhǔn)液百分吸光率為縱坐標(biāo)，對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)液濃度（ppb）的對數(shù)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)液的半對數(shù)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對應(yīng)的濃度，乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中待測物的實(shí)際濃度。

    若利用試劑盒專業(yè)分析軟件進(jìn)行計(jì)算，更便于大量樣本的準(zhǔn)確、快速分析。（索?。?/span>

9 貯藏及保存期

儲藏條件：試劑盒于2-8℃保存，避免冷凍。

保 質(zhì) 期：有效期為1年，生產(chǎn)日期見包裝盒。