什么是登革熱：

登革熱（Dengue fever）是由登革熱病引起，經(jīng)伊蚊傳播的一種急性傳染病，潛伏期通常約5-7天，具有傳播迅猛、發(fā)病率高等特點(diǎn)。患者有可能出現(xiàn)極度疲倦及抑郁癥狀，少數(shù)病者會(huì)惡化至登革熱出血，并進(jìn)一步出血、休克，乃至死亡，登革熱引起的并發(fā)癥往往是病人致死的主因。一般來(lái)說(shuō)登革熱主要分布在熱帶及亞熱帶地區(qū)。

登革熱快速檢測(cè)試劑 ( 膠體金法 )

  澳大利亞 Panbio公司一直在登革熱(Dengue fever)診斷試劑產(chǎn)品方面保持*的市場(chǎng)地，

Panbio登革熱產(chǎn)品擁有zui廣的產(chǎn)品系列，有著zui廣的應(yīng)用。產(chǎn)品準(zhǔn)確性高，特異性強(qiáng)。廣州市宜康生物公司zui早引進(jìn)國(guó)內(nèi)，給廣大顧客提供高品質(zhì)的登革熱檢測(cè)試劑。

預(yù)期作用：

Panbio登革熱快速檢測(cè)試劑盒是用來(lái)定量檢測(cè)人血清、血漿和全血中的登革熱病毒IgM和IgG抗體的方法。這方法能用來(lái)鑒別初次和二次感染。它僅能用來(lái)檢測(cè)具有臨床登革熱癥狀的病人的樣本。結(jié)果是假定陽(yáng)性的，必須經(jīng)病毒分離、雙份血清分析、免疫組織化學(xué)檢測(cè)抗原或病毒核酸檢測(cè)證實(shí)有登革熱病毒感染。

原理：

在處理病人樣本時(shí)，登革熱特異性IgM和IgG抗體和包埋在橫過(guò)盒膜的兩條線(xiàn)上的抗-人IgM和IgG抗體相結(jié)合。膠態(tài)金復(fù)合物包含重組登革熱1~4型抗原被病人的IgM和IgG捕獲而顯現(xiàn)出粉紅色的線(xiàn)。設(shè)定一個(gè)對(duì)照程序來(lái)指示方法操作正確。

試劑盒組成：

每個(gè)試劑盒包括下面的東西，數(shù)量足夠能完成包裝袋標(biāo)簽上標(biāo)明的測(cè)試份數(shù)。

•25小包。每包里面有一個(gè)試劑盒和一個(gè)10µL的MicroSafe®移液管。

•1份使用說(shuō)明書(shū)。

•1管3ml的緩沖液(含有0.1% Proclin)

必要的但不提供的材料

•計(jì)時(shí)器

一般程序

MicroSafe®移液管的操作方法

MicroSafe®移液管能用來(lái)吸全血、血漿或血清。

在吸液時(shí)請(qǐng)嚴(yán)格遵照下面的使用說(shuō)明(圖1)：

1.水平地拿著移液管。

2.吸液時(shí)，移液管的*和測(cè)試樣本接觸(見(jiàn)下圖1)。

3.輕輕地?cái)D泡排出樣本。

注意：在吸液時(shí)，不要擠泡；它會(huì)自動(dòng)充滿(mǎn)的。

 樣本收集和準(zhǔn)備：

1.靜脈血在室溫下(20~25ºC)會(huì)凝結(jié)成塊，然后根據(jù)全國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)(NCCLS)(收集診斷靜脈血的認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)程序，H3-A4, 1998)進(jìn)行離心。

血清應(yīng)盡快分離并冷藏(2~8ºC)或是冷凍(-20ºC)，如果在兩天內(nèi)不試驗(yàn)的話(huà)，應(yīng)冷凍在更低的溫度下。黃疸血清、有溶血的、脂血的或是有細(xì)菌生長(zhǎng)的血清都不推薦使用

2.不推薦使用自我解凍的致冷機(jī)來(lái)貯存樣本，因?yàn)樗芤饦颖窘?jīng)過(guò)凍融周期和降低抗體水平，因此產(chǎn)生假結(jié)果。

3.指端血采集后要馬上測(cè)試。NCCLS建議含有EDTA或肝素作為抗凝劑的全血可以不經(jīng)離心就立即使用，或者也可以在2~8ºC放上72小時(shí)(血樣處理加工的認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)程序，H18-A2, 1999)

4.發(fā)熱開(kāi)始后樣本的采集時(shí)間決定了試驗(yàn)的準(zhǔn)確度。在發(fā)熱開(kāi)始后的6~14天采得的樣本能得到zui準(zhǔn)確結(jié)果。

測(cè)試程序：

注意：在開(kāi)始實(shí)驗(yàn)前確保所有的試劑平衡至室溫(20-25°C)。

要用時(shí)，才從袋內(nèi)拿出試劑盒和MicroSafe®移液管。

. 用微量移液器或是提供的MicroSafe®移液管在圓孔內(nèi)加入10µL的全血、血清或血漿。

. 讓樣品*吸收融入圓孔里的樣品墊內(nèi)。

. 在方孔上方1cm處垂直地拿著緩沖瓶。

. 在試劑盒底部的方孔內(nèi)加入2滴緩沖液。

. 加緩沖液的剛剛15分鐘后讀結(jié)果。

. 在測(cè)試區(qū)域內(nèi)出現(xiàn)粉紅色線(xiàn)的痕跡就表明陽(yáng)性結(jié)果。

. 超過(guò)15分鐘后讀取的結(jié)果將認(rèn)為是無(wú)效的，必須要重做。

錯(cuò)誤的使用用法

1.加液時(shí)，瓶子不能水平。

2.加液時(shí)，瓶子不能接觸到樣品孔

質(zhì)量控制：

1.如果沒(méi)有出現(xiàn)對(duì)照線(xiàn)，則測(cè)試無(wú)效得重做。如果測(cè)試無(wú)效，則病人結(jié)果不能報(bào)告。

2.全血樣品可能會(huì)在視窗內(nèi)出現(xiàn)紅色的背景值。如果它沒(méi)有遮蓋住測(cè)試線(xiàn)則結(jié)果有效。

3.質(zhì)量控制需要必須遵照當(dāng)?shù)氐摹⒅莺?或國(guó)家法律或委任書(shū)和你們實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量程序。建議用戶(hù)參照NCLSI C24-A和42 CFR 493.1202(c)中的合適的質(zhì)量控制實(shí)踐指導(dǎo)

 結(jié)果解釋?zhuān)?/strong>

登革熱初次感染表現(xiàn)為發(fā)熱后3~5天能檢測(cè)到IgM抗體。二次感染表現(xiàn)為感染發(fā)作后的1~2天特異性IgG水平升高，還經(jīng)常伴有IgM水平的升高。應(yīng)該結(jié)合IgM和IgG測(cè)試線(xiàn)來(lái)解釋結(jié)果。單獨(dú)的線(xiàn)分析可能不夠準(zhǔn)確。

C：對(duì)照線(xiàn) M：IgM測(cè)試線(xiàn) G：IgG測(cè)試線(xiàn)

初次感染

在IgM和對(duì)照區(qū)域出現(xiàn)粉紅色條帶

測(cè)試說(shuō)明IgM抗體陽(yáng)性，且表明有初次登革熱感染。

二次感染

在IgM、IgG和對(duì)照區(qū)域出現(xiàn)粉紅色條帶

測(cè)試說(shuō)明IgM和IgG抗體陽(yáng)性，且表明二次登革熱感染。

二次感染

在IgG和對(duì)照區(qū)域出現(xiàn)粉紅色條帶

測(cè)試說(shuō)明IgG抗體陽(yáng)性，且表明二次登革熱感染。

陰性

僅僅在對(duì)照區(qū)域出現(xiàn)粉紅色條帶

沒(méi)有檢測(cè)到IgM和IgG抗體。結(jié)果不能排除登革熱感染。如果懷疑有登革熱感染，則在3~4天后重新測(cè)試。

無(wú)效

在對(duì)照區(qū)域沒(méi)有出現(xiàn)粉紅色條帶

測(cè)試無(wú)效得重做。