弓形蟲IgM抗體檢測試劑盒使用說明書

產(chǎn)品介紹

       弓形蟲（Toxoplasma gondii，TO）感染人體引起弓形蟲病，常造成眼、腦的損害，感染孕婦還可能造成畸胎甚至流產(chǎn)。檢測弓形蟲抗體可輔助診斷弓形蟲的感染。

       本試劑盒采用固相間接ELISA法檢測人體血清中特異性IgM抗體。

試劑及用品

操作方法

• 樣本稀釋：用樣本稀釋液(5號液)將待檢血清按1:200稀釋。陰、陽對照不用稀釋。
• 加樣反應(yīng)：樣本檢測孔每孔分別加已稀釋樣本血清100ul。同時設(shè)陰性、陽性及空白對照各一孔，取陰性、陽性對照各100ul分別加入反應(yīng)孔內(nèi)，空白對照孔僅加入100ul樣本稀釋液(5號液)。37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體，每孔加洗滌液(2號液)一滴，立即用蒸餾水注滿，靜置30秒后甩去，再直接用蒸餾水洗滌四次，甩去，拍干。
• 加酶反應(yīng)：除空白對照孔外其余每孔加酶結(jié)合物(1號液)二滴，37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體，如上洗滌，拍干。
• 顯色反應(yīng)：每孔加底物(3號液)和顯色劑(4號液)各一滴，混勻，37℃下避光顯色10分鐘。加終止液(6號液)一滴，混勻，終止反應(yīng)（加終止液后藍(lán)色會變?yōu)辄S色）。

結(jié)果判斷

• 肉眼觀察：陰性對照接近無色，陽性對照呈明顯黃色，表示實驗有效。待檢孔接近無色表示該標(biāo)本為陰性，待檢孔呈明顯黃色表示該標(biāo)本為陽性。
• 儀器判斷：以空白對照調(diào)零用酶標(biāo)儀于450nm（620nm作參比波長）讀取O.D值。待檢孔O.D值大于陰性對照2.1倍者為陽性。當(dāng)陰性對照O.D值低于0.07時按0.07計算。

注意事項

• 試劑盒在2-8℃下保存，每次取出時先平衡至室溫后使用。滴瓶每次用后一定要將蓋擰緊，各瓶蓋之間切不可混用。各試劑盒之間不可混用。
• 洗滌時將蒸餾水加滿孔內(nèi)，每次停放三十秒鐘，甩去孔內(nèi)液體。禁用自來水等其它水源。
• 為提高實驗的可比性建議使用儀器判讀結(jié)果，并對陰性對照測復(fù)孔以減少誤差。