[摘要]目的：測(cè)定制霉洗劑中苦參堿的含量。方法：采用雙波長(zhǎng)薄層掃描法。結(jié)果：本品平均回收率為99.58%，RSD為1.01％，5批樣品中苦參堿的平均值為1.18g/L。結(jié)論：方法簡(jiǎn)便、快速、靈敏度高，可用于該品的質(zhì)量控制。
[關(guān)鍵詞] 苦參堿；制霉洗劑；薄層掃描；含量測(cè)定
制霉洗劑是由苦參、黃柏、土茯苓等9味中藥制成的婦科外用液體制劑，具有清熱燥濕，殺蟲止癢的作用。臨床上用于濕熱帶下，皮膚瘙癢癥的治療。其中苦參的有效成分苦參堿具有明顯的清熱燥濕作用。本文采用雙波長(zhǎng)薄層掃描法測(cè)定苦參堿的含量，現(xiàn)報(bào)道如下。
1 儀器與試劑
CS 9000雙波長(zhǎng)薄層掃描儀（日本島津公司）；毛細(xì)點(diǎn)樣管（美國(guó)Drummond公司）；點(diǎn)樣儀（武漢分析儀器廠）；苦參堿對(duì)照品（中國(guó)藥品生物檢定所）；其他試劑均為分析純；制霉洗劑（本院制劑室，批號(hào)010113，010123，010301，010313，010408）；硅膠G板、硅膠G（青島海洋化工廠）。
2 方法與結(jié)果
2．1 溶液的配制
2 1．1 苦參堿對(duì)照品液的制備 精密稱取苦參堿對(duì)照品2.14mg，加氯仿適量，轉(zhuǎn)移至2mL{瓶中并稀釋至刻度即得。
2．1．2 制霉洗劑樣品液的制備 精密量取制霉洗劑10mL置于分液漏斗中，用氨水調(diào)pH 11，然后用氯仿50mL分次萃取，每次l0mL。合并萃取液，水浴揮去大部分氯仿后轉(zhuǎn)移至2mL量瓶中，加氯仿至刻度即得。
2．1．3 制霉洗劑陰性對(duì)照液的制備 除苦參外，其他組分按原制備方法制備，按2．1．2項(xiàng)下方法制得陰性對(duì)照液備用：
2．2 薄層層析及掃描要求
2．2．1 吸附劑與展開劑0.4％CMC-Na硅膠G板晾干后于105℃ 烘箱內(nèi)活化30min后置干燥器中備用。以苯-丙酮-乙酸乙酯-濃氨水（2：3：4：0.2）為展開劑，充分飽和60min，上行展開12 errt，碘化鉍鉀試液噴霧顯色，再噴以少量0.05mol/L亞硝酸鈉乙醇液至斑點(diǎn)顯色清晰，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，放置2h后掃描。
2．2．2 薄層掃描條件及儀器參數(shù) 將顯色后的薄層板在390～600nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)雙波長(zhǎng)反射鋸齒式掃描，λs=500 nm，λR=630nm，散射參數(shù)Sx=3，狹縫1.0 mmX 1.0mm。
2．3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 用微量進(jìn)樣器分別量取對(duì)照品溶液2，4，6，8，10μL，各兩點(diǎn)，分別點(diǎn)于同一硅膠G板上，按2．2項(xiàng)下條件層析并掃描測(cè)定，以斑點(diǎn)峰面積均值對(duì)點(diǎn)樣量繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為：Y=20119.408+6787.229X，r=0.999（n=5）。樣品含量在2.14～l0.70μg范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系。直線不通過原點(diǎn)，因此用外標(biāo)兩點(diǎn)法計(jì)算含量。
2．4 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 取苦參堿對(duì)照品液5μL點(diǎn)于薄層板上，按上述薄層條件展開，顯色放置2 h后，每隔30min掃描1次。結(jié)果在2h內(nèi)苦參堿斑點(diǎn)的峰面積值保持穩(wěn)定，RSD為2.22％（n=5）。
2．5 精密度試驗(yàn)測(cè)定 同一薄層板上的5個(gè)相同量（5μL）的對(duì)照品的峰面積值，結(jié)果RSD為1.71％（n=5）：
2．6 干擾因素的考察 在同一板上，依次點(diǎn)苦參堿對(duì)照品液、樣品液、陰性對(duì)照液各5止，按薄層條件展開。顯色后可見樣品與對(duì)照品相應(yīng)位置上顯橙紅色斑點(diǎn)，而陰性對(duì)照液在相應(yīng)位置上無(wú)對(duì)應(yīng)斑點(diǎn)。
2．7 回收率的測(cè)定 精密量取一定量的樣品液，分別定量加入苦參堿對(duì)照品，以未加對(duì)照品的樣品液為對(duì)照，按樣品測(cè)定的方法測(cè)定苦參堿的含量。結(jié)果平均回收率為99.58％，RSD為1.01％（n=5）。
2．8 樣品含量測(cè)定取樣品液5μL，對(duì)照品液4，5μL點(diǎn)于同一板上，交叉點(diǎn)樣，按2．2項(xiàng)下條件層析掃描測(cè)定，用外標(biāo)兩點(diǎn)法計(jì)算。
3 討論
曾用苯-丙酮-甲醇（8：2.5：0.5）展開，但分離不好，斑點(diǎn)不集中。用苯-乙酸乙酯-丙酮-濃氨水（3：3：1：0.1）系統(tǒng)展開，出現(xiàn)緊鄰分離的斑點(diǎn)有一條弧形現(xiàn)象。采用苯-丙酮-乙酸乙酯-濃氨水（2：3：4：0.2）展開系統(tǒng)，展開前充分飽和分離好，斑點(diǎn)集中。經(jīng)與稀碘化鉍鉀試液，改良碘化鉍鉀試液，碘化鉍鉀試液等顯色劑比較，選擇本文顯色劑，可使斑點(diǎn)顯色充分，無(wú)空心，放置2 h后測(cè)定，使斑點(diǎn)顏色更均勻，清晰，穩(wěn)定性顯著提高。
參考文獻(xiàn)：
[1] 李向陽(yáng)，屠萬(wàn)茜．潔身寶洗劑中苦參堿的薄層掃描測(cè)定[J]．中草藥，1995，26（8）：405．
[2] 黃老金，黃小鷗．薄層掃描法測(cè)定婦陰凈中苦參堿的含量[J]．廣西醫(yī)學(xué)，1997．19（4）：545．