摘要:目的：測定葛根（野葛、粉葛）及其制劑腦得生片中葛根素的含量。方法：采用毛細管電泳法,雙氯滅痛為內(nèi)標(biāo)物。測定條件為:運行緩沖液:30mmol/L硼砂緩沖溶液（pH 9.37）;操作電壓30 kV ,紫外檢測波長254nm。結(jié)果：葛根素的線性范圍為10～100μg/ml,葛根的平均回收率為96.77%（ RSD2.65% ,n=3） ;腦得生片平均回收率為:100.64%（ RSD 0.28% ,n= 3） 。結(jié)論：該方法簡便、快捷,具有良好的精密度、回收率和線性關(guān)系,結(jié)果滿意。
關(guān)鍵詞:毛細管電泳;葛根素;腦得生片
腦得生片是中國藥典2000年版一部收載成藥,處方中含葛根,具有活血化淤、疏通經(jīng)絡(luò)、醒腦開竅之功效,用于腦動脈硬化、缺血性腦中風(fēng)及腦出血后遺癥等。腦得生片原標(biāo)準(zhǔn)中無葛根素的含量測定。毛細管電泳法（HPCE 法）具有分析周期短、消耗溶劑少、費用低、抗污染能力強的優(yōu)點,適宜于葛根及其制劑中葛根素的快速定量分析。本實驗
以雙氯滅痛為內(nèi)標(biāo)測定了葛根及其制劑腦得生片中
葛根素的含量。
1 　儀器和試劑
Beckman P/A system 5000型毛細管電泳儀（美國Beckman 公司）;融熔石英毛細管柱75μm×77cm。硼砂（分析純）,甲醇（色譜純）。葛根素、雙氯滅痛對照品（中國藥品生物制品檢定所）。
2 　操作條件
運行緩沖液:30mmol/L硼砂溶液;操作電壓30kV,極性由正到負,紫外檢測波長254nm,柱溫25℃;采用壓力進樣,進樣時間5s。
毛細管沖洗方法:開機后用0.1mol/L*溶液沖洗2min ,運行緩沖液2min。每次測定之間運行緩沖液沖洗1 min。
3 　測試溶液的制備
3. 1 　對照品貯備溶液的制備
精密稱定葛根素對照品12.5mg,用甲醇定容成濃度為0.5mg/ml的對照品溶液。
3. 2 　內(nèi)標(biāo)溶液的制備
精密稱定雙氯滅痛一定量,加甲醇配成180μg/ml的溶液,備用。
3. 3 　樣品溶液的制備
3. 3. 1 　取葛根生藥粉0.1g,精密稱定,精密加入內(nèi)標(biāo)溶液50ml,稱定重量,超聲處理1h,放冷,加甲醇補足重量,靜置,取上清液作為樣品溶液。
3. 3. 2 　取腦得生10片,除去包衣,研細混勻,精密稱定0.2g,精密加入內(nèi)標(biāo)溶液25ml,稱定重量,超聲處理1h,放冷,加甲醇補足重量,靜置,取上清液作為樣品溶液。
3. 4 　陰性溶液的制備
按處方比例和腦得生片制備工藝制成不含葛根的腦得生片,照樣品溶液制備方法制備陰性溶液。
4 　結(jié)　果
4. 1 　電泳行為
在本實驗操作條件下,葛根素,雙氯滅痛分離良好,陰性溶液與對照品溶液峰及內(nèi)標(biāo)溶液峰沒有重疊。
4. 2 　線性范圍
精密吸取葛根素對照品貯備溶液0.2 ,0.4 ,0.8 ,1.2 ,1.6 ,2.0ml 置于10ml量瓶中,加入內(nèi)標(biāo)溶液5.0ml,再加甲醇至刻度,搖勻。以對照品質(zhì)量濃度x（μg/ml） 為橫坐標(biāo),以對照品的校正峰面積（峰面積/ 遷移時間,A/t） 與內(nèi)標(biāo)的校正峰面積（Ais/ Tis） 之比Y為縱坐標(biāo),計算回歸方程。葛根素的質(zhì)量濃度在10～100μg/ml范圍內(nèi)與校正峰面積成線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)r=0.9998 ,表明方法的線性關(guān)系良好?；貧w方程:Y = 0.006211+ 0.01938X ,r =0. 9998。
4. 3 　精密度
取低、中、高三個質(zhì)量濃度的葛根素對照品溶液連續(xù)進樣3次,校正峰面積的日內(nèi)精密度RSD 在1.59 %以內(nèi),日間精密度RSD在1.83%以內(nèi)。
4. 4 　回收率試驗
向已知含量的葛根及在成藥的陰性溶液中,精密加入不同量的葛根素溶液,如法測定,計算回收率。
4. 5 　樣品測定
取不同批次腦得生片以及野葛和粉葛,依法測定。
5 　討　論
野葛中葛根素含量（18.79～25.46mg/g） 明顯高于粉葛（0.824～14.32mg/g）,而且野葛的質(zhì)量相對穩(wěn)定,粉葛的品質(zhì)不一,葛根素含量變化很大。由試驗結(jié)果分析,腦得生片中加的是野葛。
參考文獻
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